2011 Fiscal Year Annual Research Report
新規ジンクフィンガー型転写抑制因子による脂肪細胞分化・脂肪蓄積の制御機構の解析
Publicly Offered Research
| Project Area | Molecular Basis and Disorders of Control of Apetite and Fat Accumulation |
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| Project/Area Number |
23126505
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
井上 順 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 講師 (70323962)
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| Keywords | 脂肪細胞 / 分化 / 脂肪肝 / 転写調節因子 |
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| Research Abstract |
Bcl11bノックアウトマウスを出生直後に観察すると、肩甲骨周囲の白色脂肪組織の顕著な萎縮が観察されることから、Bcl11bが脂肪細胞分化を制御している可能性が考えられる。本研究では、Bcl11bによる脂肪細胞分化制御機構の解明を目的とした。
マウスの脂肪組織におけるBcl11bの発現をリアルタイムPCRおよびウエスタンブロッティングによって確認することができた。Bcl11bは胸腺T細胞では細胞質に、ケラチノサイトでは核に局在することが知られている。そこで脂肪細胞におけるBcl11bの細胞内局在を検討したところ、主に核に局在することが示された。次に脂肪細胞への分化能を有する3T3-L1細胞を脂肪細胞へと分化させ、Bcl11bの発現レベルについてmRNAおよびタンパク質レベルで解析を行った。その結果、分化後1～2日で一過的に発現が上昇することが明らかになった。ウイルスベクターを用いてBcl11b発現をノックダウンしたところ、脂肪細胞への分化能の抑制と共に脂肪細胞分化のマスターレギュレーターであるPPARγの発現低下が観察された。その抑制機構の解明のため、PPARγ発現を制御することが知られている転写因子の活性にBcl11bが関与するかどうかをレポーターアッセイにより検討した。その結果、Bcl11bはC/EBPαおよびC/EBPβの活性を促進することが明らかとなった。
脂肪細胞特異的Bcl11bトランスジェニックマウスを作製した。aP2プロモーターを用いた。現時点で9頭のファウンダーマウスの入手に成功している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
申請書の計画通りにおおむね進展している。MEFを用いた解析は現時点では開始出来ていないが、来年度に作製予定であった脂肪細胞特異的Bcl11bトランスジェニックマウスについては、既に9頭のファウンダーの入手に成功している。
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| Strategy for Future Research Activity |
計画書にそって研究を遂行する。
C57BL/6バックグラウンドのBcl11b欠損マウスを作製したところ、ヘテロマウスでも体の大きさが20%程度小さくなった(BALB/Cバックグラウンドではそのような傾向は見られなかった)。体の大きさを揃えるためにC57BL/6とBALB/CのF1を作製し、解析を行う。
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