2012 Fiscal Year Annual Research Report
無細胞膜タンパク質合成による脂質代謝系の再構築
Publicly Offered Research
| Project Area | Synthetic biology for the comprehension of biomolecular networks |
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| Project/Area Number |
24119504
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
車 兪徹 東京大学, 新領域創成科学研究科, その他 (40508420)
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| Project Period (FY) |
2012-04-01 – 2014-03-31
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| Keywords | リン脂質合成 / 無細胞タンパク質合成系 / NanoDisc |
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| Research Abstract |
本研究の目的は、リン脂質の生合成に関わる酵素を無細胞系（PURE system）で合成し、リン脂質代謝系を試験管内で構築・再現することである。これによりリン脂質をモデルとした、膜タンパク質分子間ネットワークの無細胞内再構築を試みる。研究実施計画は、（１）各膜タンパク質酵素をPURE systemにより合成・定量し、スコア化すること、また（２）NanoDisc(ND)に合成と同時に膜局在させ、PURE systemから簡易的に単離することである。
これまでに、８種の膜タンパク質酵素について、PURE systemでの合成を確認した。その中で合成量の低いもの2種について、系を高度化・最適化することで合成量の回復を確認した。また、HisTagを付加したNanoDisc（ND）をもちいることで、高効率で迅速に合成産物を単離することができた。
これらの成果をもとに、第３５回日本分子生物学会年会(福岡・2012年12月11-14日)にて「Construction of membrane protein complexes by cell-free system」のタイトルで口頭発表を、第７回無細胞生命科学研究会（愛媛・2012年11月17-18日）で「無細胞タンパク質合成系による膜タンパク質複合体の構築」のタイトルで口頭発表を、「細胞を創る」研究会5.0（東京・2012年11月21-22日）で「無細胞系で創る膜タンパク質複合体」のタイトルでポスター発表をおこなった。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
25年度が最終年度であるため、記入しない。
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