2014 Fiscal Year Annual Research Report
バイオミネラリゼーションの時空間的制御を可能とするケージドタンパク質の創製
Publicly Offered Research
Project Area | Fusion Materials: Creative Development of Materials and Exploration of Their Function through Molecular Control |
Project/Area Number |
25107724
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Research Institution | The University of Tokushima |
Principal Investigator |
重永 章 徳島大学, ヘルスバイオサイエンス研究部, 講師 (10423394)
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Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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Keywords | 合成化学 / ペプチド / タンパク質 / ケージド化合物 / 非水解性リン酸化アミノ酸 |
Outline of Annual Research Achievements |
本提案研究では、紫外線照射をトリガーとしてバイオミネラリゼーションを誘起するケージドタンパク質の創製を目的とした。ケージド~とは紫外線照射により~を放出する前駆体と定義する。本研究ではまず、ケージドタンパク質創製のための基盤となる、ケージドアミノ酸大量供給経路および新規タンパク質化学合成法を確立することとした。この結果、昨年度までにケージド非水解性リン酸化アミノ酸の開発に成功するとともに、タンパク質完全化学合成法を確立した。しかし後者については、新たに二つの課題が明らかとなった。すなわち、ペプチド固相合成により調製可能なフラグメント鎖長は最長50残基程度であることから、巨大タンパク質の化学合成では多数のフラグメントの縮合が必要となり煩雑であること、および、あるアミノ酸部分でのフラグメント縮合が困難であることの二点である。そこで今年度はこれら課題の解決を目指し、新たなタンパク質合成法の検討を行った。まず前者については、各フラグメントを全て化学合成により調製するのではなく、天然型アミノ酸のみからなる大きなフラグメントは発現タンパク質の化学変換により調製し、これをケージドアミノ酸を含む小さなフラグメントと縮合することにより、1ステップにて調製することとした。この結果、天然型アミノ酸のみからなるタンパク質をフラグメント縮合法へと利用可能な形へ変換する化学的方法を見出すことに成功した。また後者については反応条件を精査することにより、従来困難とされてきたPro-Cys部位での縮合法を確立した。 当初、予期していなかったタンパク質完全化学合成法の課題が明らかとなったため、ケージドタンパク質の化学合成には至らなかったものの、本研究より得られた成果はいずれ、その基盤技術となるものと確信する。
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Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Development of a traceable linker containing a thiol-responsive amino acid for the enrichment and selective labelling of target proteins2014
Author(s)
J. Yamamoto, M. Denda, N. Maeda, M. Kita, C. Komiya, T. Tanaka, W. Nomura, H. Tamamura, Y. Sato, A. Yamauchi, A. Shigenaga, A. Otaka
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Journal Title
Org. Biomol. Chem.
Volume: 12
Pages: 3821-3826
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Development of a fluoride-responsive amide bond cleavage device that is potentially applicable to a traceable linker2014
Author(s)
J. Yamamoto, N. Maeda, C. Komiya, T. Tanaka, M. Denda, K. Ebisuno, W. Nomura, H. Tamamura, Y. Sato, A. Yamauchi, A. Shigenaga, A. Otaka
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Journal Title
Tetrahedron
Volume: 70
Pages: 5122-5127
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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