2014 Fiscal Year Annual Research Report
DISC1/Neuregulin-1とシナプス形成
Publicly Offered Research
| Project Area | Generation of synapse-neurocircuit pathology |
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| Project/Area Number |
25110715
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
森 大輔 名古屋大学, 脳とこころの研究センター, 特任講師 (00381997)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Keywords | 統合失調症 / ニューレグリン / トランスジェニックマウス / 分泌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前駆体型Neuregulin-1のDISC1による細胞内輸送制御機構
Neuregulin-1は中枢神経系細胞、末梢神経系細胞のみならず、心筋細胞、上皮細胞、線維芽細胞、血管内皮細胞などさまざまな組織で発現し、恒常性の維持と初期発生の両方に深く関与していることが知られている。前駆体型Neuregulin-1は細胞膜上で剪断され、EGFドメインを含む細胞外領域ペプチドがリガンドとして、EGFR/ErbB受容体に結合し、下流のシグナルを活性化する。
前駆体型Neuregulin-1の適切なプロセッシングの調節機構は、下流のシグナル伝達に強い影響を与えるために非常に厳密に制御されていると考えられているが、その前段階であるゴルジ体から細胞膜までの輸送制御についてはほとんど調べられていない。Neuregulin-1は発現量が非常に低く、さらに多種多様なアイソフォームが存在するために、その正確な分泌量を測定する系は存在していなかった。本研究では、細胞内局在と分泌量が同時に検出できるように、Neuregulin-1遺伝子の細胞外領域にV5タグ配列をタンデムに挿入したプラスミドベクターを作成し、改良を重ねた。さらに、Neureulin-1はゴルジ体を起点に細胞内輸送、分泌のプロセスを辿るため、遺伝子の上流にFM4ドメインを融合させたプラスミドベクターの改良版を作成した。この改良版によるV5-Neuregulin1の発現はShield-1化合物の添加により、FM4ドメインが小胞体およびゴルジ体膜より解離した。つまり、V5-Neruegulin-1の分泌制御をコントロールすることが出来た。この系を用いることにより、Neuregulin-1の分泌制御の定量的な測定が可能になり、DISC1ノックアウトマウス由来の神経細胞でその分泌量が減少していることを明らかにした。さらに、ARFタンパク質によってもこの輸送が制御されていることをこの系を用いて証明した。
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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