• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2014 Fiscal Year Annual Research Report

肺炎マイコプラズマの接着滑走マシナリーの微細構造解明と構成タンパク質の構造解析

Publicly Offered Research

Project AreaHarmonized supramolecular machinery for motility and its diversity
Project/Area Number 25117530
Research InstitutionNational Institute of Infectious Diseases

Principal Investigator

見理 剛  国立感染症研究所, その他部局等, 室長 (80270643)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2015-03-31
KeywordsMycoplasma pneumoniae / 肺炎マイコプラズマ / 接着滑走器官 / 細胞接着 / 滑走運動 / P1 アドヘジン / モノクローナル抗体
Outline of Annual Research Achievements

肺炎マイコプラズマの滑走運動メカニズムを理解するために、滑走運動に必須な P1 とP30 タンパク質の構造解析研究を進めた。P1とP30はそれぞれ170kDaと30kDaの大きさで、この菌の接着滑走器官の表面に存在している。P1は細胞接着タンパク質であるが、P30の機能はよくわかっていない。大腸菌でこれらの組換えタンパク質を発現させ、大量調製を行った。P1は分解産物の混入もあり、当初、高純度な精製が困難だったが、条件検討によって結晶化スクリーニングが可能なレベルのサンプルを得た。組換えP1は、シアル酸オリゴ糖に結合する活性も見られ、天然のP1に近い構造をもつと推定された。組換えP1とP30について結晶化スクリーニングを実施したが、どちらも結晶は得られなかった。P1は2つの断片に分けて結晶化も試みたが、研究期間内に結晶は得られなかった。組換えP1とP30を X線溶液散乱法で調べると、P1は単量体であり、長さが13nm、幅が6.5nm程度の分子形状をしていると予測された。これは電子顕微鏡によるP1の観察像に近い形状だった。一方、P30は Kratky プロットできれいなピークが現れない disorder なタンパク質であり、天然変性タンパク質である可能性が考えられた。今回、P30に対するモノクローナル抗体も複数調製したが、抗P1モノクロ抗体のように細胞接着と滑走運動を阻害するモノクロ抗体は得られなかった。今回の研究でも細胞接着と滑走運動におけるP30タンパク質の役割は明確にならなかった。本研究で大きな目標としたP1とP30タンパク質の結晶構造解析は実現しなかったが、以前は困難だったP1の大量調製法が確立できたことと、X線溶液散乱法でP1の分子形状を予測できたことは価値ある成果だった。また、抗P30モノクロ抗体は肺炎マイコプラズマの検出検査法には有効利用できると考えられた。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

  • Research Products

    (2 results)

All 2015 2014

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Genetic characterization and comparison of Clostridium botulinum isolates from botulism cases in Japan between 2006 and 20112014

    • Author(s)
      Kenri T, Sekizuka T, Yamamoto A, Iwaki M, Komiya T, Hatakeyama T, Nakajima H, Takahashi M, Kuroda M and Shibayama K
    • Journal Title

      Appl Environ Microbiol

      Volume: 80 Pages: 6954-6964

    • DOI

      10.1128/AEM.02134-14

    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Presentation] 肺炎マイコプラズマの滑走運動に必要な P1 タンパク質の構造解析2015

    • Author(s)
      見理 剛、森 茂太郎、清水 隆
    • Organizer
      生体運動合同班会議
    • Place of Presentation
      学習院大学、東京
    • Year and Date
      2015-01-07 – 2015-01-09

URL: 

Published: 2016-06-01  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi