2014 Fiscal Year Annual Research Report
Tob 蛋白質を介するCCR4-NOTデアデニレース作用の分子構造基盤
Publicly Offered Research
Project Area | Structural basis of cell-signalling complexes mediating signal perception, transduction and responses |
Project/Area Number |
25121734
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Research Institution | Okinawa Institute of Science and Technology Graduate University |
Principal Investigator |
山本 雅 沖縄科学技術大学院大学, 細胞シグナルユニット, 教授 (40134621)
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Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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Keywords | Tobタンパク質 / PABP / CCR4-NOT複合体 / CNOT7タンパク質 / mRNA分解 / X線結晶構造解析 |
Outline of Annual Research Achievements |
TobがmRNAの安定性を制御するメカニズムを確立するために、以下を進めた。1) 前年度に引き続き、Tobとpoly(A)結合タンパク質(PABP)、CNOT7デアデニレースの3者複合体の結晶構造解析を目指し、それらを大腸菌で発現させることを試みている。 2) Tobは、mRNAの3’UTRに存在するpoly(A)付加シグナルを認識するCPEBと会合すること、更にTob/CPEB複合体はCNOT7と会合し、特定のmRNAを不安定化することが報告されている。そこでTobとCPEBの結晶構造解析を計画した。その為にCPEBと結合するTobの領域(198Ser-236Ser)に含まれるペプチド断片を合成した。今後、このペプチド断片のNMR解析を進めるとともに、全長CPEBを発現させ、Tobペプチドとの結合状態を結晶構造解析する。 3) CPEB/Tob/CNOT7複合体の共結晶解析が進まないことも想定し、Tob/CNOT7が別の3’UTR結合タンパクを探索した。Tob/CNOT7が、特定のmRNA分解に寄与していることを調べる中で、CNOT7欠損マウスが高脂肪食下では肥満になりにくいことを見出した。高脂肪食下CNOT7欠損では、一部の白色脂肪組織(WAT)で熱産生が亢進し、脂肪が蓄積しにくくなっていることがその原因であることが分かった。さらに栄養源からのATP産生を熱産生に代えるUCP1(uncoupling protein 1)の発現が上昇していることを明らかにした。その分子機構を探る中で、CNOT7のみならずTobを欠損するマウスのWATにおいてもUCP1 mRNAが安定化し、発現上昇していることが分かった。さらにUCP1 mRNAの3’ UTRに存在するAU-rich 配列に結合するBRF-1がTobと会合しCNOT7を標的mRNAにリクルートすることを見出した。BRF1とTobの結合領域を決めながら結晶構造解析を進めている。
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Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(38 results)
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[Journal Article] Tropomodulin 1 Expression Driven by NF-kappaB Enhances Breast Cancer Growth.2015
Author(s)
Ito-Kureha, T., Koshikawa, N., Yamamoto, M., Semba, K., Yamaguchi, N., Yamamoto, T., Seiki, M. & Inoue, J.
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Journal Title
Cancer research
Volume: 75
Pages: 62-72
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] NR2B Phosphorylation at Tyrosine 1472 Contributes to Brain Injury in a Rodent Model of Neonatal Hypoxia-Ischemia.2014
Author(s)
Knox, R., Brennan-Minnella, A. M., Lu, F. X., Yang, D. N., Nakazawa, T., Yamamoto, T., Swanson, R. A., Ferriero, D. M. & Jiang, X. N.
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Journal Title
Stroke
Volume: 45
Pages: 3040-3047
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] LMTK3 deficiency causes pronounced locomotor hyperactivity and impairs endocytic trafficking.2014
Author(s)
Inoue, T., Hoshina, N., Nakazawa, T., Kiyama, Y., Kobayashi, S., Abe, T., Yamamoto, T., Manabe, T. & Yamamoto, T.
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Journal Title
J Neurosci
Volume: 34
Pages: 5927-5937
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Dopamine-induced tyrosine phosphorylation of NR2B (Tyr1472) is essential for ERK1/2 activation and processing of novel taste information.2014
Author(s)
David, O., Barrera, I., Chinnakkaruppan, A., Kaphzan, H., Nakazawa, T., Yamamoto, T. & Rosenblum, K.
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Journal Title
Frontiers in molecular neuroscience
Volume: 7
Pages: 66
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Dissecting the mechanism for regulation of cardiac energy metabolism by CCR4-NOT complex(口頭)2014
Author(s)
Kuba, K., Suzuki, T., Sato, T., Tomokazu, T., Takahashi, A., Yamamoto, T. & Imai, Y.
Organizer
第16回RNA学会
Place of Presentation
ウインク愛知
Year and Date
2014-07-23 – 2014-07-23
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