2014 Fiscal Year Annual Research Report
蛍光イメージングによるスクリーニング系の確立と天然物探索
Publicly Offered Research
| Project Area | Chemical Biology using bioactive natural products as specific ligands: identification of molecular targets and regulation of bioactivity |
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| Project/Area Number |
26102712
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
三輪 佳宏 筑波大学, 医学医療系, 講師 (70263845)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | 蛍光 / 天然物 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
テーマ１）シグナル伝達スクリーニング系の構築と分子機構評価
１－i）Grb2分解調節に依存したスクリーニング系の構築：蛍光タンパク質と融合させたGrb2タンパク質の分解を指標にスクリーニング可能であることは、試験的なパイロット実験でも確認済みであるが、存在量の少ない化合物をも網羅的に探索するためには、高感度化が必要である。そこで、細胞間での蛍光強度の差が少なく、かつEGF処理による分解の程度がより大きい安定細胞株を樹立した。
１－ii）Grb2分解調節の分子機構の解明：Grb2分解の分子機構については、これまでまったく報告がなかったため、上記のように複数の阻害剤で分解を抑制できることは分かったが、それらが何を意味しているのか？ どのようなタンパク質群が関わっているのか、詳細は不明である。そこで、２６年度中に、分解抑制活性を示す各種阻害剤によって解析をおこない、分解酵素の特性について明らかにした。
テーマ２）海綿抽出ライブラリーからの天然リガンド探索
２－i）EGF依存的Grb2分解調節を指標にしたスクリーニング：２６年度中に、およそ500種類の海綿類由来抽出物ライブラリーに対して一次スクリーニングを実施した。さらに活性の見られたものをさらに分画を進めた結果、複数の分子について同定することができた。
２－ii）新規天然物リガンドの分子機構の解明：探索の結果見いだされてきた新規天然物リガンドについて、細胞の増殖を抑制する分子機構について、解析を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
実験系の高度化、新規化合物の同定など、予定していた内容を順調に達成できたから。
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| Strategy for Future Research Activity |
順調に推移しているので、今後も検出系の更なる高感度化を図るとともに、見いだした新規分子の作用する分子機構の解明と、そのためのイメージングツールの拡充を進めることに重点をシフトしていくことも必要である。
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