2015 Fiscal Year Annual Research Report
脳におけるコンドロイチン硫酸およびヒアルロン酸の代謝分解機構の解明
Publicly Offered Research
| Project Area | Deciphering sugar chain-based signals regulating integrative neuronal functions |
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| Project/Area Number |
26110719
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| Research Institution | Meijo University |
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Principal Investigator |
山田 修平 名城大学, 薬学部, 教授 (70240017)
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| Project Period (FY) |
2014-04-01 – 2016-03-31
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| Keywords | コンドロイチン硫酸 / ヒアルロン酸 / 脳 / 神経 / ヒアルロニダーゼ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、これまでに解明されていない脳・神経系におけるコンドロイチン硫酸（CS）代謝分解機構を明らかにし、分解酵素による脳・神経系におけるCSの機能調節機構を調べようとしている。今年度は、（１）脳内におけるCSおよびヒアルロン酸（HA）分解酵素活性の検出、およびその酵素活性を担うタンパク質の同定、（２）CSおよびHA分解酵素の候補遺伝子の脳内における発現量の詳細な解析、（３）脳・神経に由来する培養細胞を用いた、CSおよびHA分解機構の解明、（４）脳・神経における主要なCSおよびHA分解酵素の性状・機能解析を目指した。（１）および（３）に関して、酵素活性の検出に成功した。それぞれからの酵素の精製を開始したが、（３）の培養細胞を用いる方が効果的に精製できると考え、（１）の脳組織からの酵素精製に関しては中断した。イオン交換クロマトグラフィーによって部分精製ができた。現在質量分析を用いたタンパク質の同定を行っている。（２）については、様々な酵素の発現解析ができ、ヒアルロニダーゼ２の高発現を観察した。ヒアルロニダーゼ２の貢献を確認するため、shRNAによるノックダウン細部株を樹立し、現在解析中である。（４）の項目については、（１）～（３）までで特定の分子の同定にまで至っていないため、解析を進めることはできなかった。また、上記以外に、CS特異的な加水分解酵素として我々が同定したHYAL4について、酵母でのHYAL4大量発現系の構築と酵素の大量調製、細胞内でのHYAL4の局在部位の解析、HYAL4の基質特異性に最も大きく貢献するアミノ酸残基の同定を行った。これらの研究成果の一部は、複数の学会で報告した。
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| Research Progress Status |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
27年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Skeletal dysplasia in a consanguineous clan from the island of Nias/Indonesia is caused by a novel mutation in B3GAT32015
Author(s)
Birgit S. Budde, Shuji Mizumoto, Ryo Kogawa, Christian Becker, Janine Altmuller, Holger Thiele, Franz Ruschendorf, Mohammad R. Toliat, Gerrit Kaleschke, Johannes M. Hammerle, Wolffang Hohne, Kazuyuki Sugahara, Peter Nurnberg, and Ingo Kennerknecht
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Journal Title
Hum. Genet.
Volume: １３４
Pages: 691－704
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Receptor protein tyrosine phosphatase beta/zeta is a functional binding partner for vascular endothelial growth factor2015
Author(s)
Marina Koutsioumpa, Evangelia Poimenidi, Evangelia Pantazaka, Christina Theodoropoulou, Angeliki Skoura, Vasileios Megalooikonomou, Nelly Kieffer, Jose Courty, Shuji Mizumoto, Kazuyuki Sugahara, and Evangelia Papadimitriou
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Journal Title
Mol. Cancer
Volume: 14
Pages: 19
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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