Development of optical probes and actuators to investigate singularity cells

• Project Area: Singularity biology
• Project/Area Number: 18H05410
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Innovative Areas (Research in a proposed research area)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Complex systems
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 永井 健治 大阪大学, 産業科学研究所, 教授 (20311350)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉村 英哲 東京大学, 大学院理学系研究科(理学部), 助教 (90464205)
• Project Period (FY): 2018-06-29 – 2023-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2022)
• Budget Amount: ¥130,130,000 (Direct Cost: ¥100,100,000、Indirect Cost: ¥30,030,000); Fiscal Year 2022: ¥25,870,000 (Direct Cost: ¥19,900,000、Indirect Cost: ¥5,970,000); Fiscal Year 2021: ¥25,870,000 (Direct Cost: ¥19,900,000、Indirect Cost: ¥5,970,000); Fiscal Year 2020: ¥25,870,000 (Direct Cost: ¥19,900,000、Indirect Cost: ¥5,970,000); Fiscal Year 2019: ¥25,870,000 (Direct Cost: ¥19,900,000、Indirect Cost: ¥5,970,000); Fiscal Year 2018: ¥26,650,000 (Direct Cost: ¥20,500,000、Indirect Cost: ¥6,150,000)
• Keywords: 生物発光 / 蛍光 / 光操作 / イメージング / 発光 / 生理機能操作 / 光音響

Outline of Annual Research Achievements

本年度は領域発足時より進めている、各種可視化プローブおよび細胞操作ツールの開発を引き続き行い、実際に生きた細胞に導入してその性能を評価した。以下の1、２，３の課題を設定してそれぞれ開発を進めた。
1.化学発光および光音響を利用したリアルタイム機能イメージング法の開発: 組織や個体内の１細胞機能を捉えるための、化学発光および光音響効果を利用した細胞機能プローブの開発を行った。また、励起エネルギー移動によりルシフェラーゼ発光を赤色・近赤色化するため様々な蛍光タンパク質との組み合わせの効果を検証した。
2.時空間トランススケール生体操作ツール群の創出とシンギュラリティ現象の操作法開発: 技術的優位性が確立されている青色光受容体を用いたオプトジェネティクスツールの開発を中心に行った。具体的には植物光受容体LOV2-Jαを用いてRNA結合タンパク質ドメインPUM-HDの機能を制御する光応答型内在性RNA捕捉ツールを開発した。また、細胞間張力の制御を指向した光応答型カドヘリン分子の開発を行った。
3. 領域内での連携による各開発: A03生物班や公募班の要望に応じて可視化プローブおよびオプトジェネティクスツールの開発を進め、段階的に成果を得た。また技術開発支援班の有する装置を利用して、新規な分析方法の可能性を模索した。最終的にAMATERASを用いて解析をすることを想定して、領域として有する知見や技術を活かした有機的な連携を行った。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

1. 化学発光による生体プローブ開発を複数の標的に対して並行して進めた。そのうち、化学発光と蛍光双方で検出が可能なバイモーダルCa2+プローブについて実際に細胞に導入することで、薬剤刺激に対するCa2+の増減をリアルタイムに検出することに成功した。開発の成果を投稿論文にて発表した。
赤色あるいは近赤外色の高光度化学発光タンパク質の開発を目標として、既存の発光タンパク質に蛍光タンパク質を連結することで、FRET現象による長波長側への波長シフトを試みた。使用する蛍光タンパク質種や連結の順番を複数試すことにより、その効果を検証した。
2. 光応答型RNA機能操作ユニットの開発に着手した。具体的にはRNA結合タンパク質ドメインPUM-HDの二分割体候補分子ライブラリを構築した。またGolden Gate法を用いて変異PUM-HDモチーフのライブラリを構築し、多様な標的RNA配列に対応する準備を整えた。加えて、光応答型カドヘリンを構築し、細胞間張力を光照射により制御する系を開発した。開発の成果を投稿論文にて発表した。
3. A03-1班との連携としてタウ凝集を検出する化学発光プローブおよび光操作ツールの開発を行った。化学発光プローブでは、細胞中でタウタンパク質の凝集を特異的に検出するプローブを開発し、凝集を誘導する薬剤を細胞添加した際の発光上昇を確認した。光操作ツールでは、青色光受容体とタウタンパク質を組み合わせて、培養細胞中のタウタンパク質を光照射により凝集できるツールを構築した。
技術開発支援班が開発したセルソーターを利用して、化学発光を呈する細胞もしくはタンパク質単離の可能性を検討した。計画班が有する高輝度発光タンパク質に対して、その発光が検出できることを確認した。

Strategy for Future Research Activity

化学発光タンパク質eNLの高輝度化および細胞機能プローブへの応用: eNLの構成成分のうち蛍光タンパク質を他の種類に置き換えることで高輝度化を行う。各種細胞機能プローブへ導入し、トランススケールイメージングへの適用を進める。
耐酸性蛍光タンパク質の多色化: 緑色蛍光タンパク質Gamillusが有する耐酸性を保持したまま、現在の緑色から短波長もしくは長波長へシフトした変異体を開発する。開発した変異体タンパク質を使用することで、細胞中の様々な環境下で可視化解析が可能な、生理機能プローブを開発する。
生体適応性を示す外部刺激応答ユニットの開発: ダウンコンバージョンやアップコンバージョンを示すナノ粒子やルシフェラーゼを用いた生体内部で発生する青色光を用いた操作系、ferritin変異体内で自発的に形成する磁性ナノ粒子を用いた操作系など、各種マテリアルを利用することで、生体深部での機能発現を指向した生体変換ユニット群を開発する。
各種生理現象の光制御・操作を実現する分子ユニットの開発：二分割型PUM-HDと植物光受容体LOV2-Jαを融合して、RNA結合タンパク質ドメインPUM-HDの機能を制御する光応答型内在性RNA捕捉ツールを開発する。またA03-2班と連携し、光刺激によりゲノム編集のON/OFFを精密に制御する方法を開発し、初期発生や分化における生理プロセスの光操作法開発を行う。
タウタンパク質凝集を検出する化学発光プローブおよび光操作ツールの開発: 開発した赤色化学発光プローブについて、その性能をマウス神経芽細胞を用いて評価する。高輝度化学発光タンパク質によるプローブも並行して開発し、マウス脳に導入した際に効果的に発光が検出できるプローブを最終的に選択する。光操作ツールについては、光刺激による凝集が当該細胞内および周囲の細胞に伝播するかどうか、マウス神経芽細胞を用いて検証する。

Research Products

• [Journal Article] 高輝度発光タンパク質による高感度バイオイメージング (2020)
  • Author(s): 松田知己, 永井健治
  • Journal Title: 光学 Volume: 49 Pages: 26-30
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Multiary complex formations in GPCR signaling activations. (2020)
  • Author(s): Watanabe M, Yoshimura H, Arjunan S. N. V, Kaizu K, Takahasashu K.
  • Journal Title: arXiv Volume: -
  • Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] 光増感蛍光タンパク質を用いた多色機能破壊 (2020)
  • Author(s): 松田知己, 永井健治
  • Journal Title: 細胞 Volume: 52 Pages: 47-50
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 多色の光増感蛍光タンパク質を用いた複数機能の個別破壊 (2020)
  • Author(s): 松田知己, 永井健治
  • Journal Title: アグリバイオ Volume: 4 Pages: 61-65
  • NAID: 40022457168
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 細胞・個体イメージング用光学プローブの開発 (2019)
  • Author(s): 鈴木和志, 稲垣成矩, 松田知己, 永井健治
  • Journal Title: 化学工業 Volume: 70 Pages: 516-520
  • NAID: 40021957204
• [Journal Article] Genetically encoded fluorescence/bioluminescence bimodal indicators for Ca2+ imaging (2019)
  • Author(s): Israt Farhana, Md Nadim Hossain, Kazushi Suzuki,Tomoki Matsuda, Takeharu Nagai
  • Journal Title: ACS Sensors Volume: 4 Pages: 1825-1834
  • DOI: 10.1021/acssensors.9b00531
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Acid-Tolerant Reversibly Switchable Green Fluorescent Protein for Super-resolution Imaging under Acidic Conditions (2019)
  • Author(s): Shinoda Hajime、Lu Kai、Nakashima Ryosuke、Wazawa Tetsuichi、Noguchi Kosuke、Matsuda Tomoki、Nagai Takeharu
  • Journal Title: Cell Chemical Biology Volume: 26
  • DOI: 10.1016/j.chembiol.2019.07.012
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Photocleavable Cadherin Inhibits Cell-to-Cell Mechanotransduction by Light (2019)
  • Author(s): Endo Mizuki、Iwawaki Takumi、Yoshimura Hideaki、Ozawa Takeaki
  • Journal Title: ACS Chemical Biology Volume: 14 Pages: 2206-2214
  • DOI: 10.1021/acschembio.9b00460
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] 蛍光マグネシウムイオンプローブの開発とそれを利用した新たな染色体凝縮メカニズムの解明 (2019)
  • Author(s): 前島一博, 松田知己, 永井健治
  • Journal Title: マグネシウム Volume: 37 Pages: 13-18
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Simultaneous monitoring of Ca2+ responses and salivary secretion in live animals reveals a threshold intracellular Ca²⁺ concentration for salivation. (2019)
  • Author(s): Nezu A, Morita T, Nagai T, Tanimura A
  • Journal Title: Experimental Physiology Volume: 104 Pages: 61-69
  • DOI: 10.1113/ep086868
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 光るタンパク質が拓く未来社会 (2020)
  • Author(s): 永井健治
  • Organizer: 北海道大学 公共政策大学院 第6回文理融合セミナー
  • Invited
• [Presentation] Analysis of molecular motility and assembly in living cells based on single molecule imaging to understand mechanisms of cellular functions (2020)
  • Author(s): Hideaki Yoshimura, Takeaki Ozawa
  • Organizer: 日本化学会第100春季年会
• [Presentation] Long Time Single Molecule Tracking on Receptor Molecules in the Plasma Membrane to Understand Signal Transduction. (2019)
  • Author(s): Hideaki Yoshimura, Takeaki Ozawa
  • Organizer: Focus on Microscopy
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] マルチモーダルトランススケールイメージングの展望 (2019)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 光ネットワークシステム技術第171委員会第67回研究会
  • Invited
• [Presentation] 「シンギュラリティ生物学」概説 (2019)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 第19回日本蛋白質科学会年会 第71回日本細胞生物学会大会 合同年次大会
• [Presentation] Development of fluorescent/ bioluminescent probes toward singularity biology (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: TOPICAL PROBLEMS OF BIOPHOTONICS
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Singularity Biology overview (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: The 1st International Training Course for Singularity Biology
• [Presentation] SUPER-DUPER BIOLUMINESCENT PROTEINS FOR WIDE RANGE OF BIOIMAGING (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: AIBBC Workshops (4th Africa International Biotechnology and Biomedical Conference)
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Presentation] TRANS-SCALE IMAGING TOWARD SINGULARITY BIOLOGY (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: AIBBC Conference (4th Africa International Biotechnology and Biomedical Conference)
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Presentation] Molecular tools for optical control of the fate of receptors in living cells. (2019)
  • Author(s): Osamu Takenouchi, Hideaki Yoshimura, Takeaki Ozawa
  • Organizer: Royal Society of Chemistry Tokyo International Conference
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] トランスケールイメージングが拓く新たな地平 (2019)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 第60回日本組織細胞化学会総会・学術集会
  • Invited
• [Presentation] Trans-Scale Imaging for Singularity Biology (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: The 6th International Symposium on Bioimaging & The 28th Annual Meeting of the Bioimaging Society
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Opening Remarks about Singularity Biology: Small elements change the function of the whole systems (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: The 57th Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Signal transduction mechanism revealed with single molecule imaging of Akt on the plasma membrane. (2019)
  • Author(s): Hideaki Yoshimura, Takeaki Ozawa
  • Organizer: The 57th Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] トランススケールイメージングが拓く生命科学の新たな潮流 (2019)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 理化学研究所 - 広島大学 合同シンポジウム 「イメージングから理論」
  • Invited
• [Presentation] Singularity Biology: small elements change the function of the whole systems (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: ICSB2019 Workshop (The 20th International Conference on Systems Biology)
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 分子動態からメカニズムを探る－生細胞1分子イメージングを用いたアプローチ－ (2019)
  • Author(s): 吉村英哲
  • Organizer: 第11回光塾
  • Invited
• [Presentation] Trans-scale imaging toward singularity biology (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: 18th IPR Retreat
  • Invited
• [Presentation] The roles of receptor oligomerization for signal transduction - A study through single-molecule live-cell imaging- (2019)
  • Author(s): Hideaki Yoshimura
  • Organizer: 13th International Symposium on Nano Medicine
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Presentation] ハナガサクラゲ由来色素タンパク質の試験管内進化と光音響イメージングへの応用 (2019)
  • Author(s): 永井健治
  • Organizer: 第13回先端的バイオ計測研究会
• [Presentation] Bimodal Ca2+ indicator toward spatiotemporally-scalable imaging (2019)
  • Author(s): Israt Farhana, Kazushi Suzuki, Tomoki Matsuda, Takeharu Nagai
  • Organizer: The 22nd SANKEN International Symposium
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] A reversibly photoconvertible chemiluminescent protein for bioimaging with high depth resolution (2019)
  • Author(s): Yuhei Ogami, Mitsuru Hattori, Takeharu Nagai
  • Organizer: The 22nd SANKEN International Symposium
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Development of a reversibly photoswitchable fluorescent protein with fast chromophore maturation and enhanced brightness for cell imaging (2019)
  • Author(s): Shusaku Uto, Tetsuich Wazawa, Takeharu Nagai
  • Organizer: The 22nd SANKEN International Symposium
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Generation of inventive genetically modified chemiluminescent plants by using a potent new generation luciferase (2019)
  • Author(s): Quang Tran, Kenji Osabe, Takeharu Nagai
  • Organizer: The 22nd SANKEN International Symposium
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Toward photoacoustic bioimaging with a chromoprotein (2019)
  • Author(s): Yoshimasa IKE, Tetusichi WAZAWA, Tomoki MATSUDA, Takeshi NAMITA, Tsuyoshi SHINA, Takeharu NAGAI
  • Organizer: The 22nd SANKEN International Symposium
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] A bimodal bioluminescent Ca2+ indicator toward spatiotemporally-scalable imaging (2019)
  • Author(s): Tomoki Matsuda, Israt Farhana, Kazushi Suzuki, Takeharu Nagai
  • Organizer: SPIE. PHOTONICS WEST BIOS
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Presentation] Fluorescent protein vs chemiluminescent protein (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: バイオ情報計測技術研究会
• [Presentation] Singularity biology (2019)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: OIST Mini-Symposium The 16th International Membrane Research Forum
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Presentation] 分子動態解析による細胞内分子作動機構の解明-生細胞1分子イメージングによるアプローチ- (2019)
  • Author(s): 吉村英哲
  • Organizer: 第95回創薬科学セミナー
• [Presentation] Bioluminescent indicators for neuroscience research (2018)
  • Author(s): Nagai T.
  • Organizer: The 41st Annual Meeting of the Japan Neurosience Society
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Presentation] 蛍光・化学発光ライブイメージングの現状と展望 (2018)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 組織細胞化学講習会
  • Invited
• [Presentation] 高輝度化学発光バイオ光源の開発とその応用利用 (2018)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 第20回日本光生物協会年会
  • Invited
• [Presentation] 蛍光・化学発光ライブイメージングの現状と展望 (2018)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 第３回JKiCイメージングセミナー
  • Invited
• [Presentation] Evolution of fluorescent proteins toward easy and bio-compatible super-resolution imaging (2018)
  • Author(s): Nagai T. (Organizer)
  • Organizer: First UK/Japan Super-resolution Bioimaging Meeting
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Highly-biocompatible superresolution imaging by SPoD-ExPAN with Lp-regularized image reconstruction (2018)
  • Author(s): Tetsuichi Wazawa, Yoshiyuki Arai, Yoshinobu Kawahara, Takashi Washio, Takeharu Nagai
  • Organizer: 第56回日本生物物理学会年会
• [Presentation] Genetically encoded photoswitchable indicators towards super-resolution calcium imaging (2018)
  • Author(s): Kai Lu, Tomoki Matsuda, Tetsuichi Wazawa, Satsuki Fujiwara, Takeharu Nagai
  • Organizer: 第56回日本生物物理学会年会
• [Presentation] Bimodal Ca2+ indicator toward spatiotemporally-scalable imaging (2018)
  • Author(s): Israt Farhana, Kazushi Suzuki, Tomoki Matsuda, Takeharu Nagai
  • Organizer: 生理学研究所研究会
• [Presentation] Photoswitchable indicators towards nanoscopic calcium imaging (2018)
  • Author(s): Kai Lu, Tetsuichi Wazawa, Tomoki Matsuda, Takeharu Nagai
  • Organizer: 生理学研究所研究会
• [Presentation] シンギュラリティ生物学 (2018)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 生理学研究所研究会
• [Presentation] A bimodal fluorescent and bioluminescent Ca2+ indicator toward spatiotemporallyscalable imaging (2018)
  • Author(s): Takeharu Nagai
  • Organizer: Janelia Conferences: Fluorescent Proteins and Biological Sensors VI
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Bimodal Ca2+ indicator toward spatiotemporally-scalable imaging (2018)
  • Author(s): Israt Farhana, Kazushi Suzuki, Tomoki Matsuda, Takeharu Nagai
  • Organizer: Janelia Conferences: Fluorescent Proteins and Biological Sensors VI
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 発光タンパク質の開発による生命科学研究への貢献 ～バイオイメージング技術からスマート社会に役立つ技術への展開～ (2018)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 第36回（平成30年度）大阪科学賞表彰式・記念講演
  • Invited
• [Presentation] シンギュラリティ生物学 (2018)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 第三回 ルミノジェネティクス研究会
• [Presentation] マグネシウムイオン指示薬の開発とバイオイメージングへの応用 (2018)
  • Author(s): 永井 健治
  • Organizer: 第38回マグネシウム学会
• [Presentation] 生細胞内RNA可視化プローブを用いた機能性RNAの1分子追跡 (2018)
  • Author(s): 吉村英哲、山田俊理、島田林太郎、小澤岳昌
  • Organizer: 第12回バイオ関連シンポジウム
• [Presentation] 機能解析を志向した生細胞内RNAの1分子標識・動態分析法 (2018)
  • Author(s): 吉村英哲、山田俊理、江口正敏、島田林太郎、小澤岳昌
  • Organizer: 日本分析化学会第67年会
• [Presentation] Analysis of real-time motion of signal transduction molecule Akt in living cells to reveal its functioning mechanism (2018)
  • Author(s): Hideaki Yoshimura, Takeaki Ozawa
  • Organizer: 第56回日本生物物理学会年会
• [Presentation] A single molecule imaging approach to understand signal transduction on the plasma membrane in living cells (2018)
  • Author(s): Hideaki Yoshimura
  • Organizer: International Symposium on Nano Medicine 2018
  • Int'l Joint Research
• [Book] 月刊化学 2019年4月号, 細胞膜は二次元流体の夢を見るか？ (2019)
  • Author(s): 吉村英哲
  • Total Pages: 2
  • Publisher: 東京化学同人
• [Book] 発光イメージング実験ガイド, プロトコール編、Ⅱ．機能を可視化するセンサープローブ, 発光Ca2＋プローブの種類と特性 (2019)
  • Author(s): 鈴木和志，永井健治
  • Total Pages: 6
  • Publisher: 羊土社
  • ISBN: 9784758122405
• [Book] 発光イメージング実験ガイド, 発展編 , 蛍光／発光バイモーダルプローブ (2019)
  • Author(s): 松田知己，Israt Farhana，永井健治
  • Total Pages: 5
  • Publisher: 羊土社
  • ISBN: 9784758122405
• [Book] 発光イメージング実験ガイド, 二分割ルシフェラーゼ再構成法による発光プローブ (2019)
  • Author(s): 吉村英哲、小澤岳昌
  • Total Pages: 9
  • Publisher: 羊土社
  • ISBN: 9784758122405
• [Book] 高生体適合性SPoD-ExPANイメージング /生きてるものは全部観る！イメージングの選び方・使い方100 (2018)
  • Author(s): 和沢鉄一、永井健治
  • Total Pages: 2
  • Publisher: 羊土社
  • ISBN: 4758103755
• [Book] 蛍光タンパク質_ⅰ.総論 /生きてるものは全部観る！イメージングの選び方・使い方100 (2018)
  • Author(s): 篠田肇、永井健治
  • Total Pages: 3
  • Publisher: 羊土社
  • ISBN: 4758103755
• [Book] 蛍光タンパク質_ⅴ.マグネシウム指示薬 /生きてるものは全部観る！イメージングの選び方・使い方100 (2018)
  • Author(s): 松田知己、永井健治
  • Total Pages: 2
  • Publisher: 羊土社
  • ISBN: 4758103755
• [Book] 蛍光タンパク質_ⅵ.脳活動計測のための膜電位プロープ /生きてるものは全部観る！イメージングの選び方・使い方100 (2018)
  • Author(s): 稲垣成矩、揚妻正和、永井健治
  • Total Pages: 3
  • Publisher: 羊土社
  • ISBN: 4758103755
• [Book] 発光タンパク質 /生きてるものは全部観る！イメージングの選び方・使い方100 (2018)
  • Author(s): 鈴木和志、永井健治
  • Total Pages: 3
  • Publisher: 羊土社
  • ISBN: 4758103755
• [Book] 生命分子の機能を超えるための解析化学 /生命機能に迫る分子化学：生命分子を真似る、飾る、超える (2018)
  • Author(s): 吉村英哲、小澤岳昌
  • Total Pages: 6
  • Publisher: 化学同人
  • ISBN: 9784759813906
• [Book] Chapter 7, Optical Control of G Protein-Coupled Receptor Activated in Living Cells /Progress in Photon Science: Recent Advances (2018)
  • Author(s): Hideaki Yoshimura, Takeaki Ozawa
  • Total Pages: 10
  • Publisher: Springer Series in Chemical Physics
• [Remarks] 「シンギュラリティ生物学」領域HP
  • URL: http://singularity-bio.jp/