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カルシウム透過型グルタミン酸受容体で誘導される可塑性遺伝子群の同定とその発現機構

Research Project

Project/Area Number 00J02280
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Functional basic dentistry
Research InstitutionNihon University

Principal Investigator

近藤 真啓  日本大学, 歯学部, 特別研究員(PD)

Project Period (FY) 2000 – 2002
Project Status Completed (Fiscal Year 2002)
Budget Amount *help
¥3,600,000 (Direct Cost: ¥3,600,000)
Fiscal Year 2002: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2001: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2000: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Keywordsカルシウムイオン / calbindin-D28k / CREBリン酸化 / AMPA型グルタミン酸受容体
Research Abstract

昨年度までに、AMPA受容体の活性化によって生じる転写因子CREBのリン酸化には、Ca^<2+>結合蛋白の一つであるcalbindin-D28kの核移行が必要であることを明らかにしてきた。
アデノウィルスベクターを用いて「Ca^<2+>透過型AMPA受容体(GluR2Q)」および「calbindin-D28k、CB-GFP(核移行能欠失型calbindin-D28k)またはGFP(コントロール)」を各種細胞株へ共発現させ、AMPA/cyclothiazide刺激によって生じる細胞内Ca^<2+>動態をfura-2イメージング法により解析した。GFP共発現群と比較して、calbindin-D28k共発現群で有意にAMPA受容体を介した細胞内へのCa^<2+>流入量が増加することを見出した。この増加はCB-GFP共発現群においても観察されたことから、細胞質に存在するcalbindin-D28kによる効果であることが示唆された。
このCa^<2+>流入量の増加は機能受容体数の増加に起因するとの仮説を立て、AMPA受容体の細胞外領域認識抗体を用いた免疫染色および細胞膜表面蛋白のビオチン標識法を用いたウェスタンブロットにより、細胞膜表面上に存在するAMPA受容体の定量を試みた。calbindin-D28kまたはCB-GFPの共発現によりCa^<2+>透過型AMPA受容体の細胞膜表面上における発現が有意に増加することを見出した。一方、Ca^<2+>非透過型AMPA受容体の発現には影響を及ぼさなかった。
以上の結果から、calbindin-D28kは核における転写因子活性化の制御に加え、細胞質においては受容体の細胞内動態を規定する機能を有することが明らかとなった。そしてこのデュアル機能により、calbindin-D28kはAMPA受容体を介した情報伝達に寄与している可能性が示唆された。

Report

(1 results)
  • 2002 Annual Research Report
  • Research Products

    (3 results)

All Other

All Publications (3 results)

  • [Publications] Kondo M, Miwa A, Okado H: "Roles of calbindin-D28k for cell surface expression of AMPA receptors"Jpn. J. Physiol.. 52. S117 (2002)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report
  • [Publications] 近藤真啓, 岡戸晴生: "Ca^<2+>透過型AMPA受容体とCa^<2+>結合蛋白の機能連関"医学のあゆみ. 202. 1017-1022 (2002)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report
  • [Publications] Kondo M, Miwa A, Okado H: "NUCLEAR TRANSLOCATION OF CALBINDIN-D28K REGULATES AMPA RECEPTOR-DEPENDENT CREB PHOSPHORYLATION IN CORTICAL NEURONS"Axon Guidance & Neural Plasticity (Abstract of papers presented at the 2002 CSHL meeting). 116 (2002)

    • Related Report
      2002 Annual Research Report

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Published: 2000-04-01   Modified: 2024-03-26  

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