癌抑制遺伝子p53と相同性の高いp73の機能解析

• Project/Area Number: 00J03653
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Biological pharmacy
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 高木 慎二 京都大学, ウイルス研究所, 特別研究員(DC1)
• Project Period (FY): 2000 – 2002
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2002)
• Budget Amount: ¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000); Fiscal Year 2002: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2001: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2000: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
• Keywords: p73 / p53 / Wnt / β-catenin

Research Abstract

これまでに我々は、p73スプライシングバリアントめ一つであるp73βが、がん抑制遺伝子産物p53とは逆にWnt/β-cateninシグナルを活性化することを見出した。この活性化にはp73βの転写活性化能を必要としたため、p53では転写誘導されない、p73β特異的な標的遺伝子が存在することが予想された.そこで、アデノウイルスベクターを用いてp73βを培養細胞内に発現させ、LacZを発現させたコントロール細胞との間で遺伝子発現の違いをSuppression Subtractive Hybridization法を用いて検索した。その結果、p73βによりmRNAの発現が誘導されるいくつかのcDNAを単離した。Northern Blot法による解析から、その中にp53では発現誘導されずp73βでのみmRNAの発現が誘導される遺伝子が存在することがわかった。この遺伝子産物が、Wnt/β-cateninシグナルを活性化するかどうかについてレポーターアッセイ法を用いて検討したが、活性化が認められなかった。しかしながら、この遺伝子産物はp73に依存したアポトーシスに重要な役割を果たしていることがわかった。
上記研究と共に、肝がんで変異が多数認められるWnt/β-cateninシグナルに関する研究にも着手した。Wnt/β-cateninシグナルの阻害因子であるキナーゼNLKは転写因子TCF/LEFをリン酸化することが知られる。我々は、NLKがそのキナーゼ活性とは非依存的にWnt/β-cateninシグナルを阻害することを見出した。また、NLKによるTCF/LEFのリン酸化が、TCF/LEFのタンパク質安定性に影響を及ぼすことを明らかにした。

Research Products

• [Publications] 上田佳秀: "Wnt/β-catenin signaling suppresses apoptosis in low serum medium and induces morphologic change in rodent fibroblasts"International Journal of Canter. 99(5). 681-688 (2002)