チロシンリン酸化を介したシナプス前制御機構に関する研究
Project/Area Number |
02F00549
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Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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Allocation Type | Single-year Grants |
Section | 外国 |
Research Field |
Neurochemistry/Neuropharmacology
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Research Institution | Kitasato University |
Principal Investigator |
高橋 正身 北里大学, 医学部, 教授
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
陳 乃宏(CHEN Naihong) 北里大学, 医学部, 外国人特別研究員
CHEN Nai?hong 北里大学, 医学部, 外国人特別研究員
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Project Period (FY) |
2002 – 2004
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2003)
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Budget Amount *help |
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 2003: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2002: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
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Keywords | 神経伝達物質 / チロシンリン酸化 / チロシンキナーゼ / チロシンホスファターゼ / PC12細胞 / シナプス可塑性 |
Research Abstract |
培養したラット小脳顆粒細胞に1μMのIonomycinを2分間作用させ、細胞内へのCa^<2+>流入を引き起こすと顕著なグルタミン酸の放出が誘発された。この際、予め小脳顆粒細胞をタンパク質チロシンホスファターゼの阻害剤であるPTPi-1で10分間前処理しておくと、濃度依存的にIonomycin誘発性のグルタミン酸放出が抑制された。PC12細胞からのドーパミン放出もPTPi-1で抑制された。PTPi-I未処理の状態でPC12細胞のタンパク質を、抗リン酸化チロシン抗体を用いてイムノブロット解析すると、約116-136kDa付近に3本のチロシンリン酸化バンドが認められた。Ionomycin 1μM2分間作用させるとこれらのバンドは認められなくなり、Ca^<2+>依存的な脱リン酸化を受けることが明らかとなった。この際予め細胞をPTPi-1 100μMで2min前処理をしておくと、これらのCa^<2+>依存的な脱リン酸化は顕著に抑制された。しかしPTPi-1の前処理を10minを行った場合にもリン酸化バンドがみられなくなり、Ca^<2+>非依存的な機構によっても脱リン酸化が起こることが考えられた。この場合引き続きIonomycin 1μMで2分間刺激すると、約116-136kDa付近に3本のチロシンリン酸化バンドが再び認められた。イムノブロット解析から116kDaおよび125kDaのタンパク質はそれぞれPyk2およびFAKであることが明らかとなった。
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Report
(2 results)
Research Products
(3 results)