| Project/Area Number |
03454228
|
|---|
| Research Category |
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
|
| Allocation Type | Single-year Grants |
|---|
| Research Field |
Gastroenterology
|
|---|
| Research Institution | Kagoshima University |
|---|
Principal Investigator |
有馬 暉勝 鹿児島大学, 医学部, 教授 (10116428)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
前田 栄樹 鹿児島大学, 医学部・附属病院, 助手 (70238856)
|
|---|
| Project Period (FY) |
1991 – 1992
|
| Project Status |
Completed (Fiscal Year 1992)
|
| Budget Amount *help |
¥6,600,000 (Direct Cost: ¥6,600,000)
Fiscal Year 1992: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Fiscal Year 1991: ¥4,800,000 (Direct Cost: ¥4,800,000)
|
|---|
| Keywords | C型肝炎ウイルス(HCV) / 遺伝子クローニング / 免疫スクリーニング / HCV抗体 / HCV-RNA / ポリメラーゼチェインリアクション(PCR) / ウイルス変異 / ワクチン / C型肝炎ウィルス(HCV) / RNAウィルス / 変異 / PCR法 |
|---|
| Research Abstract |
C型肝炎ウィルス(HCV)の遺伝子構造が明らかにされ、診断面では各種第二世代のHCV抗体の開発により十分な感度で血清診断が可能となった。我々も独自にHCVの遺伝子のクローニングを行い、コア抗原と非構造蛋白(NS3領域)との複合抗原を用いた高感度の新しいHCV抗体検出系を開発した。
1.HCV遺伝子の免疫スクリーニングによるクローニング
C型肝炎患者血清よりAGPC法によりRNAを抽出し、ランダムプライマーを用いてλgtII-cDNAライブラリーを作成し、患者(急性C型肝炎患者回復期および慢性C型肝炎)血清を抗体として用いクローニングを行った。患者プール血清よりスタートしたひとつのcDNAライブラリーから幸運にも構造蛋白領域をコードするクローン2個を含むHCVの各領域の特異的cDNAクローンを得た。
2.新しい高感度HCV抗体検出系の開発
コア領域をコードするS29抗原とNS3領域をコードするS4抗原の混合抗原を用いたELISAによるHCV抗体測定系はきわめて高感度であり、現在開発されている第二世代HCV抗体検出系(アボットII)と同等以上の感度、特異性を有し、臨床応用が期待される。
|
