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ヒメツリガネゴケ葉緑体におけるRNA編集の分子機構の解明

Research Project

Project/Area Number 04J05942
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field 植物生理・分子
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

宮田 有希  名古屋大学, 理学研究科, 特別研究員-DC1

Project Period (FY) 2004 – 2006
Project Status Completed (Fiscal Year 2006)
Budget Amount *help
¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
Fiscal Year 2006: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2005: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2004: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywords転写後制御 / 葉緑体 / ヒメツリガネゴケ
Research Abstract

本研究は、ヒメツリガネゴケ葉緑体RNA編集の制御因子を同定することを目的とする。まず第1に、RNA編集をリアルタイムで検出するための葉緑体ベクターの開発とRNA編集検出用の葉緑体形質転換コケを作製する。第2に、葉緑体形質転換コケのタグ付き突然変異体ゲノムライブラリーを作製し、この中からRNA編集欠損株を選抜する。最終的に、葉緑体RNA編集制御因子の候補遺伝子を絞り込むことを目標に研究を行う。
本年度は、前年度に引き続いて、RNA編集検出用の葉緑体形質転換コケの作製を行った。
前年度に作製した、rps14遺伝子の5'末端ACGコドン(C→U編集される)を含む約100ヌクレオチドの領域と蛍光タンパク質GFPを融合させたキメラコンストラクトを用い、ポリエチレングリコール法によって、野生型ヒメツリガネゴケの葉緑体ゲノムに導入した。その結果、約300株と多数の候補株を得た。これらの株では、RNA編集が起こると、レポーター遺伝子コード領域の手前で翻訳終結コドン(UGA)が形成され、レポータータンパク質が翻訳されないが、RNA編集が起きなくなると、翻訳終結コドンは形成されず、レポータータンパク質が翻訳されることが期待される。まずPCR法とサザンブロット法により、rps14-gfp融合遺伝子が確かに葉緑体ゲノムに挿入されている株が約30株あることを確認した。現在、これらの形質転換株を用いてRNA編集を検出することが可能であるか検証中である。今後は、この株を用いてタグ付き突然変異体を多数作製し、RNA編集欠損株を選抜する。

Report

(3 results)
  • 2006 Annual Research Report
  • 2005 Annual Research Report
  • 2004 Annual Research Report
  • Research Products

    (2 results)

All 2006 2004

All Journal Article (2 results)

  • [Journal Article] Extensive RNA Editing in Transcripts from the PsbB Operon and RpoA Gene of Plastids from the Enigmatic Moss Takakia lepidozioides2006

    • Author(s)
      Mamoru Sugita, Yuki Miyata, Kaori Maruyama, Chika Sugiura, Tomotsugu Arikawa, Masanobu Higuchi
    • Journal Title

      Biosci.Biotechnol.Biochem. 70

      Pages: 2268-2274

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Tissue- and stage-specific RNA editing of rps14 transcripts in moss (Physcomitrella patens) chloroplasts2004

    • Author(s)
      Yuki Miyata, Mamoru Sugita
    • Journal Title

      Journal of Plant Physiology 161

      Pages: 113-115

    • Related Report
      2004 Annual Research Report

URL: 

Published: 2004-04-01   Modified: 2024-03-26  

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