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植物の澱粉生合成および貯蔵タンパク質集積における制御機構の解明

Research Project

Project/Area Number 04J08923
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Applied biochemistry
Research InstitutionHokkaido University

Principal Investigator

濱田 茂樹  北海道大学, 大学院・農学研究科, 特別研究員(PD)

Project Period (FY) 2004 – 2005
Project Status Completed (Fiscal Year 2005)
Budget Amount *help
¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Fiscal Year 2005: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 2004: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Keywords澱粉生合成 / 貯蔵タンパク質 / セリンプロテアーゼ / 細胞骨格結合タンパク質 / starch branching enzyme / glycine rich RNA binding protein
Research Abstract

本研究は,澱粉・貯蔵タンパク質生合成における制御機構を,タンパク質翻訳後修飾および細胞内mRNA輸送レベルで解明することを目的とした.
1.澱粉生合成においては,昨年度の研究からインゲンマメstarch branching enzyme 2(PvSBE2)をプロセシングする酵素として,セリンプロテアーゼの一種であるsubtilase(PvSLP1)を同定した.今年度は本プロテアーゼcDNAのクローニングを行った.登熟種子から調製したcDNAライブラリーをスクリーニングし,PvSLP1をコードするcDNAを単離した.塩基配列の解析から,本cDNAは2414bpからなり,769アミノ酸残基のORFを含むことが明らかとなった.また予想されるアミノ酸配列は,ダイズ由来subtilaseと高い相同性を示した.精製酵素のN末端配列およびPvSLP1の推定アミノ酸配列から,2つの異なる翻訳開始点が予想された.現在,形質転換体タバコを用いた細胞内局在性の解析を試みている.
2.貯蔵タンパク質生合成においては,イネプロラミンmRNA輸送に関与すると考えられる,細胞骨格結合120kDaタンパク質(Rp120)と複合体分子を形成するタンパク質の同定を目的とした.昨年度の研究からtwo hybrid systemを用いたスクリーニングにより,glycine rich RNA binding protein, unknown proteinを候補タンパク質として見出した.今年度は,これら候補タンパク質をコードする遺伝子の単離および大腸菌発現系を構築し,得られた発現酵素を用いて抗体を作成した.今後は免疫沈降法等によってin vitroにおける結合活性を検討する予定である.

Report

(2 results)
  • 2005 Annual Research Report
  • 2004 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2006 2004

All Journal Article (4 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Enhanced turnover of transitory starch by expression of up-regulated ADP-glucose pyrophosphorylases in Arabidopsis thaliana2006

    • Author(s)
      Yumiko Obana et al.
    • Journal Title

      Plant Science 170(1)

      Pages: 1-11

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Characterization of Starch Synthase I and II Expressed in Early Developing Seeds of Kidney Bean (Phaseolus vulgaris L.)2004

    • Author(s)
      Takeshi Senoura eet al.
    • Journal Title

      Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry 68(9)

      Pages: 1949-1960

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Starch Properties of the Sago Palm (Metroxylon sago Rotth.) in Different Soils2004

    • Author(s)
      Kouichi Nozaki et al.
    • Journal Title

      Plant Foods for Human Nutrition 59(3)

      Pages: 85-92

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Functional characteristics of C-terminal regions of starch-branching enzymes from developing seed of kidney bean (Phaseolu vulgaris L.)2004

    • Author(s)
      Hiroyuki Ito et al.
    • Journal Title

      Plant Science 166(5)

      Pages: 1149-1158

    • Related Report
      2004 Annual Research Report
  • [Book] Plant Cell Monographs2006

    • Author(s)
      Haruhiko Washida et al.
    • Publisher
      Springer-Verlag Berlin Heidelberg(In Press)
    • Related Report
      2005 Annual Research Report

URL: 

Published: 2004-04-01   Modified: 2024-03-26  

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