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DNA修復の最終素過程であるDNA再結合の分子機構と制御

Research Project

Project/Area Number 05270205
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionTokyo Medical and Dental University

Principal Investigator

寺岡 弘文  東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教授 (30019137)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山本 興太郎  東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (40000971)
Project Period (FY) 1993
Project Status Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help
¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
Fiscal Year 1993: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
KeywordsDNA修復 / DNAリガーゼ / DNA依存性プロテインキナーゼ / c-Myc / リン酸化 / 基本転写因子
Research Abstract

DNA鎖連結反応を触媒するDNAリガーゼは、哺乳動物細胞に於いては分子種I,II,IIIが存在し、Iは少なくともDNA複製、IIIは修復に関与しているものと推定されている。正常ラット肝細胞核から得られたリガーゼはIIIのタイプであり、IやIIは殆ど認められなかった。次に、色素性乾皮症A群相補遺伝子産物XPAC蛋白質とDNAリガーゼの相互作用を探究したが、XPACとDNAリガーゼの物理的結合を支持する結果は得られなかった。又、DNAリガーゼ反応に対しXPACやPCNAは何ら影響しなかった。最近、リガーゼIIIとXRCC1(CHOのDNA修復変異株EM9を相補するヒトの遺伝子)遺伝子産物が複合体を形成しているとの報告があり、種々の修復関連遺伝子産物とリガーゼの相互作用についての検討がさらに必要となっている。
2本鎖DNA依存性プロテインキナーゼ(DNA-PK)は、多くの複製/転写制御因子や酵素をリン酸化し、活性化にDNA末端を要求することから、DNAの修復や組換えにも関与している可能性が高い。DNA-PKはDNAリガーゼIをリン酸化したが、XPAC,PCNA,DNAポリメラーゼβはin vitroの基質とならなかった。さらに、Raji細胞からのDNA-PKの簡易精製法の確立、DNA依存性を与える調節成分としてのKu蛋白質の同定、第二の認識アミノ酸配列P-S/T-Xの発見、Raji細胞での増殖に非依存的な活性レベルの発見、等が今年度行われた。又、既にDNA-PKの基質となることを見いだしているc-Mycに関して、DNA-PKがN端側の^<58>Thr(転写活性化とトランスホーメーションに関与)をin vitroでリン酸化することや、基本転写因子TBPとTFIIBがDNA-PKによってリン酸化され、生物活性に変化の生じることも示された。

Report

(1 results)
  • 1993 Annual Research Report
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All Other

All Publications (6 results)

  • [Publications] Takase,Kozo: "Difinition of mid- and late G1 phase events in DMSO-arrested lymphoid cells:Differential regulation of the cyclin-dependent kinase cdc2 and cdk2." Journal of Cellular Biochemistry. Suppl.17A. 140 (1993)

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  • [Publications] Teraoka,Hirobumi: "DNA-activated protein kinase in Raji Burkitt's lymphoma cells.Phosphorylation of nuclear protein factors involved in DNA DNA replication and transcription." Journal of Cellular Biochemistry. Suppl.17A. 305 (1993)

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      1993 Annual Research Report
  • [Publications] Teraoka,Hirobumi: "Expression of active human DNA ligase I in Escherichia coli cells that harbor a full-length DNA ligase I cDNA construct." Journal of Biological Chemistry. 268. 24156-24162 (1993)

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      1993 Annual Research Report
  • [Publications] Watanabe,Fumiaki: "Molecular properties,substrate-specificity and regulation of DNA-dependent protein kinase from Raji Burkitt's lymphoma cells." Biochimica et Biophysica Acta. (in press).

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  • [Publications] Takase,Kozo: "Release from Go/G1 arrest induced by dimethyl sulfoxide in human lymphoid cells:Regulation of synthesis and activation of the p33cdk2 and p34cdc2 kinases." Cell Growth & Differentiation. (in press).

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  • [Publications] 寺岡弘文: "DNA依存性プロテインキナーゼ(注目されるシグナル伝達因子)" 実験医学. 11. 1852-1853 (1993)

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Published: 1993-04-01   Modified: 2016-04-21  

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