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オーキシン作用機構の分子生物学的解析

Research Project

Project/Area Number 05276206
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

高橋 陽介  東京大学, 大学院・理学系研究科, 助手 (90183855)

Project Period (FY) 1993
Project Status Completed (Fiscal Year 1993)
Budget Amount *help
¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
Fiscal Year 1993: ¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
Keywords植物ホルモン / 形質転換植物 / 光親和標識
Research Abstract

本研究ではタバコ葉肉細胞プロトプラストおよびタバコ培養細胞BY-2からオーキシンで発現が制御される遺伝子群をクローン化しその機能並びに発現制御機構を解析することを目的としている。これまでにparA,parB,parC,arcAをクローン化して解析してきた。本年度は以下のような成果があった。
1.parBの産物とIAAの結合
最近シロイヌナズナから同定されたオーキシン結合タンパク質がparBの産物と高い相同性を有する事が報告された。そこでparBの産物に関してアジ化IAAを用いて光親和標識法で検討したところ、オーキシンにより誘導されるparB遺伝子の産物がIAAと結合するという大変興味深い結果が得られた。
2.arcAの大腸菌内での過剰発現
arcAとマルトース結合蛋白質の大腸菌内で過剰発現させることに成功した。融合タンパク質を精製後、factor Xaで切断してマルトース結合蛋白質の部分を除去しarcAタンパク質を精製し、これを抗原として抗体を作製する。
3.オーキシンによる遺伝子発現制御機構の解析
parA,B,C,arcAのcDNAと完全に一致するゲノミッククローンを単離し、GUSをレポーターとしてシス領域の解析を行った。parBに関しては一般に行われている5'側からの欠失変異体を用いた解析に加えて、プロモーター領域を断片化しTATAボックスと転写開始部位のみから成る最少プロモーターに直接接続し、オーキシンに対する応答を制御しているのはどの領域なのか詳細に調べた。その結果、転写開始部位から上流-211〜-162と-546〜-280の二つの領域が独立にオーキシンによる遺伝子活性化を司っていることが明らかになった。

Report

(1 results)
  • 1993 Annual Research Report
  • Research Products

    (4 results)

All Other

All Publications (4 results)

  • [Publications] Takahashi et al.: "Function and modulation of expression of auxin-regulated genes." International Review of Cytology. 152(in press). (1994)

    • Related Report
      1993 Annual Research Report
  • [Publications] Ishida et al.: "Isolation of cDNA of an auxin-regulated gene encoding a G protein β subunit-like protein from tobacco BY-2 cells." Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90. 11152-11156 (1993)

    • Related Report
      1993 Annual Research Report
  • [Publications] Takahashi et al.: "Functions and modulations of auxin-regulated genes." J.Plant Research. 106. 357-367 (1993)

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      1993 Annual Research Report
  • [Publications] Nagata et al.: "Molecular and Cell Biology of Plant Cell Cycle." Kluwer Pub.Co.,Utrecht, 222 (1993)

    • Related Report
      1993 Annual Research Report

URL: 

Published: 1993-04-01   Modified: 2016-04-21  

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