Project/Area Number |
05F05426
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Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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Allocation Type | Single-year Grants |
Section | 外国 |
Research Field |
Biofunction/Bioprocess
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Research Institution | The University of Tokyo |
Principal Investigator |
長棟 輝行 The University of Tokyo, 大学院・工学系研究科, 教授
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
HAN S.-W. 東京大学, 大学院・工学系研究科, 外国人特別研究員
韓 成雄 東京大学, 大学院・工学系研究科, 外国人特別研究員
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Project Period (FY) |
2005 – 2007
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2007)
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Budget Amount *help |
¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000)
Fiscal Year 2007: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2005: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
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Keywords | セルサージェリー / ナノ針 / 原子間力顕微鏡 / 単一組胞操作 / 遣伝子導入 / 単一細胞操作 / 遺伝子導入 / ナノニードル / 遺伝子発現をオン / オフ制御 |
Research Abstract |
遺伝子導入が難しいと言われている初代培養間葉系幹細胞では70%以上の高効率遺伝子導入が可能であった。ナノニードルからの遺伝子の拡散を解析し、リアルタイムでのDNA拡散を観察することが可能であった。さらにナノニードルを用いた遺伝子導入を行った直後の細胞を回収し、導入された遺伝子の量について詳しい解析を行った結果、ナノニードルでのDNA導入ではDNAの量が細胞一つにあたり10^4程度であることが明らかになった。既存のDNA導入方法では細胞一つあたりのDNA導入量が10^5〜10^6に対して、1/10〜1/100の導入量でも高効率のDNA導入に成功した。特に単一細胞操作であるマイクロインジェクションの7倍以上のDNA導入率を達成することが可能であった。 本研究成果によって今まで明らかになっていない新たな事実を発見することが可能であった。外来遺伝子導入では導入される遺伝子の量が非常に多いことがあきらかになった。理論的にはワンコピーのDNAが核の中に導入されれば遺伝子発現が起こらないといけない。しかしながら、実際の遺伝子導入では10^5〜10^6のDNAが導入されても発現効率はそれほど高くはない。その理由としては導入された外来遺伝子が核の中のピストン蛋白質により凝縮され、発現不活性化がおこると考えられる。
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Report
(3 results)
Research Products
(6 results)
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[Journal Article] A low invasive and high efficient gene delivery method into a single cell using nanoneedle and AFM2006
Author(s)
Sung-Woong Han, Takanori Kihara, Yosuke Imai, Hideki Kamiishi, Sayaka Kaneko, Noriko Kotobuki, Ohgushi, Hajime, Teruyuki Nagamune, Chikashi Nakamura, Jun Miyake
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Journal Title
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