サイクリックADPリボース高親和性安定等価体の創製とその標的分子同定への応用
Project/Area Number |
05J08935
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Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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Allocation Type | Single-year Grants |
Section | 国内 |
Research Field |
Drug development chemistry
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Research Institution | Hokkaido University |
Principal Investigator |
工藤 高志 北海道大学, 大学院薬学研究院, 特別研究員(PD)
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Project Period (FY) |
2005 – 2006
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 2006)
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Budget Amount *help |
¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Fiscal Year 2006: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2005: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
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Keywords | サイクリックADPリボース / サイクリックADPカーボサイクリックリボース / 細胞内Ca^<2+>放出系 / 光アフィニティープロープ / 光アフィニティープローブ |
Research Abstract |
サイクリックADPリボース(cADPR)結合蛋白質に対する特異的な光アフィニティープローブとして、8-アジド-3"-O-アジドエチルサイクリックADPカーボサイクリックリボース(cADPcR)を設計、合成した。しかし、この誘導体のウニ卵抽出液中におけるCa^<2+>放出活性を評価したところ、ほぼ不活性であった。この理由をcADPcRに対して2箇所置換基を導入したためと考え、8-位のアジド基を除去した3"-O-アジドエチルcADPcRを新たに設計、合成した。しかし、この誘導体もまたウニ卵抽出液中におけるCa^<2+>放出活性はEC_<50>=15μMであり、cADPcR(EC_<50>=0.079μM)と比べて著しく低下した。以上の結果から、cADPcRの3"-位に嵩高い置換基は許容されず、この位置を修飾して特異的な光アフィニティープローブを合成することは困難であることが判明した。 一方、cADPcRおよびすべてのcADPcR誘導体が、Jurkat T細胞においてcADPRと比べてCa^<2+>放出活性が低下したことを踏まえて、T細胞においてcADPRと同等のCa^<2+>放出活性を示すことを期待した新たな誘導体、4",6"-不飽和cADPcRを設計した。この誘導体は、cADPcRに比べてよりcADPRに近い安定配座を取ることができ、そのためcADPRと同等の生理活性を示すと考えた。しかし、予想に反しこの誘導体のウニ卵抽出液中におけるCa^<2+>放出活性は、EC_<50>=1.9μMとcADPcRよりも低下した。そこで、溶液中の安定配座を解析したところ、おそらく二重結合を導入したことにより歪みが生じ、cADPRとは異なる配座であることが判明した。一方、T細胞においてはcADPRよりは弱いもののcADPcRを上回るCa^<2+>放出活性を示した。現在、この理由を検討中である。
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Report
(2 results)
Research Products
(4 results)
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[Journal Article] Synthesis of cyclic ADP-carbocylcic-xylose and its 3"-O-methyl analogue as stable and potent Ca2+ -mobilizing agents.2006
Author(s)
Kudoh, T, Matsuda, A, Shuto, S, Murayama, T, Ogawa, Y.
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Journal Title
Nucleosides, Nucleotides & Nucleic acids Vol.25
Pages: 583-599
Related Report
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[Journal Article] Synthesis of stable and cell-type selective analogues of cyclic ADP-ribose, a Ca^<2+>-mobilizing second messenger. Structure-activity relationship of the N1-ribose moiety.2005
Author(s)
T.Kudoh, M.Fukuoka, S.Ichikawa, T.Murayama Y.Ogawa, M.Hashii, H.Higashida, S.Kunerth, K.Weber, A.H.Guse, B.V.L.Potter, A.Matsuda, S.Shuto
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Journal Title
Journal of the American Chemical Society Vol.127
Pages: 8846-8855
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