脳虚血および再潅流時における細胞内Oxidative Stressの経時的解析

Research Project

Project/Area Number	07770466
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Neurology
Research Institution	Keio University
Principal Investigator	渡辺茂慶應義塾大学, 医学部, 助手 (10230963)
Project Period (FY)	1995
Project Status	Completed(Fiscal Year 1995)
Budget Amount *help	¥800,000 (Direct Cost : ¥800,000) Fiscal Year 1995 : ¥800,000 (Direct Cost : ¥800,000)
Keywords	脳虚血 / 再潅流 / フリーラジカル / 過酸化水素(H_2O_2) / DCFH / ROS / カタラーゼ
Research Abstract	脳虚血再潅流障害のおいてフリーラジカルが深く関与していることは従来から指摘されている。一般にフリーラジカルは半減期が短くて反応性に富むためin vivoでの測定が非常に困難であり、これまでの報告はほとんどがin vitroでのデータであった。今回我々は光学顕微鏡と過酸化水素(H_2O_2)指示性の蛍光色素Dichlorofluorescin (DCFH)を用いて、全脳虚血再潅流時におけるin vivoでの細胞内ROS (Reactive oxygen species)の経時的測定を試み以下の結果を得た。対象とした20匹のSDラットを以下の3群(A群: 虚血再潅流群(10例)、B群:SHAM手術群(5例)、C群:カタラーゼ前投与後虚血再潅流群(5例))に分け検討したところ、10分間の全脳虚血(両側総頚動脈閉塞および全身低血圧)中にはROSは増加することなく3群間に有意差を認めなかった。しかし再潅流後にはROSの急激な増加を認め、既に再潅流2分後よりA群はB群に比し有意な増加(9.82±5.79% vs-2.82±2.51% ; p<0.05)を認め、その有意な増加は再潅流30分後(18.38±9.77% vs-3.58±4.20% ; p<0.05)まで持続した。C群では再潅流後にカタラーゼによりROSの増加が抑えられ、その抑制は再潅流10分後より有意(1.77±4.57% vs12.67±6.15% ; p<0.05)であった。今回の結果からは脳虚血再潅流時のOxidative Stressは虚血中は明らかでなく再潅流時の極めて早期より認められ、少なくとも再潅流30分間は持続すること、及び腹腔内に前投与したカタラーゼによってかなりのOxidative Stressが軽減されることが示された。