トウモロコシ幼葉鞘におけるインドール酢酸合成細胞の特定と細胞内局在に関する研究
| Project/Area Number |
07J07171
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 国内 |
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| Research Field |
植物生理・分子
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan University |
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Principal Investigator |
西村 岳志 Tokyo Metropolitan University, 大学院・理工学研究科, 特別研究員(DC1)
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| Project Period (FY) |
2007 – 2009
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2009)
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| Budget Amount *help |
¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
Fiscal Year 2009: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2008: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
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| Keywords | IAA / トウモロコシ幼葉鞘 / 抗IAA抗体 / NPA / IAA生合成 / 重力屈曲 / ZmSAUR2 / IAA抗体 / GC-MS / トウモロコシ / イネ / 幼葉鞘 / PIN / マイクロアレイ |
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| Research Abstract |
1)抗IAA抗体によるIAAの免疫組織科学法の確立
昨年度までの研究報告にもあったように、トウモロコシ幼葉鞘では重力刺激後にIAA偏差分布が形成され、またIAA合成部位である先端部ではNPAやBFAなどのIAA輸送阻害剤の処理によりIAAの蓄積が観察されることがわかっている。IAA合成部位である幼葉鞘先端において免疫組織科学的手法によりIAA合成細胞を特定するためには、まず使用する抗体のIAAに対する特異性を調べ、先に述べたような実際のIAA量の変化を検出できるようにするための技術開発が必要である。まず、IAA抗体シグナルは微弱であるため、アルカリフォスファターゼ結合型の二次抗体を用いたシグナル増幅法を用いることで、小さなシグナルを確実に検出することを考えた。そしてIAA抗体(mouse ; monoclonal antibody)の組織化学的検出における特異性を、二次抗体のシグナルの強さとGC-MSによるIAA定量値を比較することで検討を加えた。その結果、本IAA抗体は結合型IAAを認識せず、IAAを特異的に認識し得ることがわかった。
2)幼葉鞘におけるIAAの分布とNPAによるIAAの蓄積部位
幼葉鞘におけるIAAの分布を詳細に観察したところ、IAAは主に内表皮を中心に分布しており、また外表皮にも存在していることが示された。幼葉鞘先端2mm以内で最もIAA合成活性が強い部位を特定するため、NPAによりIAAが特に蓄積する部位を特定することを試みた。GC-MSの結果と同じく0.5-1.5mmの部位で強いシグナルが得られた。これらより、この領域にIAAを最も活発に合成する細胞(群)が存在することが示唆された。
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Report
(3 results)
Research Products
(17 results)
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[Journal Article] Differential downward stream of auxin synthesized at the, tip has a key role in gravitropic curvature via TIRI/AFBs-mediated auxin signaling pathways2009
Author(s)
Nishimura, T., Nakano, H., Hayashi, K., Niwa, C., Koshiba, T.
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Journal Title
Plant Cell Physiol 50
Pages: 1874-1885
Related Report
Peer Reviewed
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[Journal Article] A rice tryptophan deficient dwarf mutant, tdd1, contains a reduced level of indole acetic acid and develops abnormal flowers and organless embryos2009
Author(s)
Sazuka, T., Kamiya, N., Nishimura, T., Ohmae, K., Sato, Y, Imamura, K., Nagato, Y., Koshiba, T., Nagamura, Y., Ashikari, M., Kitano, H., Matsuoka, M.
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Journal Title
Plant J. 60
Pages: 227-241
Related Report
Peer Reviewed
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[Journal Article] Biochemical analysis of indole-3-acetaldoxime-dependent auxin biosynthesis in Arabidopsis2009
Author(s)
Sugawara, S., Hishiyama, S., Jikumaru, Y., Hanada, A., Nishimura, T., Koshiba, T., Zhao, Y., Kamiya, Y., Kasahara, H.
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Journal Title
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 106(13)
Pages: 5430-5435
Related Report
Peer Reviewed
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