小脳の生後発達における、巨大分泌蛋白質リーリンの機能

• Project/Area Number: 07J10094
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Neuroscience in general
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 日比 輝正 Nagoya City University, 大学院・薬学研究科, 特別研究員(DC2)
• Project Period (FY): 2007 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2008)
• Budget Amount: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000); Fiscal Year 2008: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000); Fiscal Year 2007: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
• Keywords: 小脳 / リーリン / 神経細胞移動 / ApoER2 / AP融合蛋白質 / プルキンエ細胞 / 顆粒細胞 / Rab11 / オルタナティブスプライシング / ノックインマウス

Research Abstract

前年度までで、リーリンとアルカリフォスファターゼとの融合蛋白質により、生後小脳では内顆粒細胞がリーリンを受容し、プルキンエ細胞は受容しないことが分かった。これまでプルキンエ細胞がリーリン受容細胞だと予想されていたため、プルキンエ細胞のリーリン受容能を時間を追って解析すると、誕生直後にはリーリン受容能があるが、細胞表面への移動と共に受容能が低下し、出生直前に一列に整列する時点では受容能が無いことが分かった。一方リーリン欠損マウスでは、生後でもプルキンエ細胞はリーリン受容能を有していた。つまり、プルキンエ細胞のリーリン受容能の消失は、リーリンにより受容体がダウンレギュレーションされることが原因だと考えられた。他方、胎生期の顆粒細胞はリーリン受容能を持たないことも明らかとなり、生後小脳の内顆粒細胞が有するリーリン受容能は、細胞移動よりもむしろ神経ネットワーク形成に関与する可能性が示唆された(投稿中)。また、前年度に、小脳にはリガンド結合ドメインの異なる複数のApoER2アイソフォームがあり、リーリンへの結合性に違いがあることを明らかにした。そこで、その1つであるLA12378-ApoER2のみを認識する抗体を作製した。この抗体による免疫染色から、生後小脳ではLA12378-ApoER2が内顆粒層にのみ発現することが明らかとなった(Neurosci.Res.,2009)。更に、前年度に明らかにした、ApoER2依存的なリーリンN末端断片の再分泌についても追究を行ない、この現象がRab11依存的な輸送経路によることが明らかになった(FEBS Lett.,in press)。

Research Products

• [Journal Article] Splicing variations in the ligand-binding domain of ApoER2 results in functional differences in the binding properties to Reelin (2009)
  • Author(s): Hibi, T., Mizutani, M., Baba, A., Hattori, M.
  • Journal Title: Neuroscience Research 63 Pages: 251-258
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The extremely conserved C-terminal region of Reelin is not necessary for secretion but is required for efficient activation of downstream signaling. (2007)
  • Author(s): Nakano, Y., Kohno, T., Hibi, T., Kohno, S., Baba, A., Mikoshiba, K., Nakajima, K., Hattori, M.
  • Journal Title: The Journal of Biological Chemistry 282 Pages: 20544-20552
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The N-terminal fragment of Reelin is generated after endocytosis and released through the pathway regulated by Rab11
  • Author(s): Hibi, T., Hattori, M.
  • Journal Title: FEBS Letters (in press)
  • Peer Reviewed
• [Presentation] リーリン受容体ApoER2の2つのスプライシングバリアントにおける機能的差異 (2008)
  • Author(s): 日比輝正, 水谷真人, 馬場敦, 服部光治
  • Organizer: BMB2008
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 2008-12-09
• [Presentation] リーリンΔC-FLAGノックインマウスの表現型解析 (2008)
  • Author(s): 中野良美, 河野孝夫, 日比輝正, 馬場敦, 御子柴克彦, 仲嶋一範, 服部光治
  • Organizer: Neuro 2008
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2008-07-09
• [Presentation] リーリン受容体ApoER2スプライシングバリアントに対するリーリンの結合能の差異 (2008)
  • Author(s): 日比輝正, 水谷真人, 馬場敦, 服部光治
  • Organizer: 第54回日本薬学会東海支部大会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 2008-07-05
• [Presentation] Regulated expression and downregulation of functional Reelin receptors indicates complex actions of Reelin during brain development (2008)
  • Author(s): Uchida, T., Baba, A., Hibi, T., Miyata, T., Nakajima, K., Hattori, M.
  • Organizer: Cortical Development Meeting 2008
  • Place of Presentation: Crete (Greece)
• [Presentation] Function of the highly conserved C-terminal region of Reelin : a knock-in study (2008)
  • Author(s): Nakano, Y., Hibi, T., Kohno, T., Baba, A., Hattori, M.
  • Organizer: Cortical Development Meeting 2008
  • Place of Presentation: Crete (Greece)
• [Presentation] Functional Reelin receptors in the adult mouse subventricular zone/rostral migratory stream (2008)
  • Author(s): Perez-Martinez, F. J., Lakoma, J., Cifuentes, M., Hibi, T., Hattori, M., Luque, J. M.
  • Organizer: Cortical Development Meeting 2008
  • Place of Presentation: Crete (Greece)
• [Presentation] リーリンは、エンドサイトーシス後にプロセシングを受け、N末側断片が細胞外に放出される (2007)
  • Author(s): 日比輝正、服部光治
  • Organizer: BMB2007
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2007-12-14
• [Presentation] The extremely conserved C-terminal region of Reelin is not necessary for secretion but is required for efficient activation of downstream signaling (2007)
  • Author(s): Nakano, Y., Kohno, T., Hibi, T., Kohno, S., Baba, A., Mikoshiba, K., Nakajima, K., Hattori, M.
  • Organizer: Neuroscience2007
  • Place of Presentation: 米国・サンディエゴ
  • Year and Date: 2007-11-03
• [Presentation] 脳形成に必須の分泌タンパク質リーリンの分泌と機能における、C末端領域の機能解析 (2007)
  • Author(s): 中野良美、河野孝夫、日比輝正、河野志織、馬場敦、御子柴克彦、中嶋一範、服部光治
  • Organizer: Neuro2007
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2007-09-12
• [Remarks]
  • URL: http://www.phar.nagoya-cu.ac.jp/research_course/res_course14.html
• [Remarks]
  • URL: http://www.phar.nagoya-cu.ac.jp/research_course/res_course14.html