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宿主側因子Tat結合蛋白質に関する形態学的、分子生物学的検討

Research Project

Project/Area Number 08269221
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionOsaka City University

Principal Investigator

佐藤 真  大阪市立大学, 医学部, 助教授 (10222019)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 米田 託成  大阪市立大学, 医学部, 助手 (70271179)
高木 宏  大阪市立大学, 医学部, 教授 (30163174)
Project Period (FY) 1996
Project Status Completed (Fiscal Year 1996)
Budget Amount *help
¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
Fiscal Year 1996: ¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
KeywordsHIV / AIDS / 宿主側因子 / Tat / TBP-1 / 転写 / 26Sプロテアゾーム / 精巣
Research Abstract

Tat結合蛋白質(TBP-1)は、HIVの転写活性化因子Tat蛋白質に結合し、HIVの増殖を抑制する宿主側因子と考えられている。しかしながらTBP-1の発現様式、生理機能の解析などは未だなされていない。本年得られた結果を以下に記す。
(1)マウスTBP-1のほぼ全長と思われるcDNAをクローニングし、その塩基配列を決定した。その結果、報告されているヒトTBP-1より長い5'側非翻訳領域が得られ、また新たなる翻訳開始部位と考えられる部位を同定した。
(2)新しく得たマウスTBP-1 cDNAの塩基配列をもとにプローブを作成し、ノーザンブロット解析およびin situハイブリダイセーション組織化学法を施行し、正常成熟マウス組織におけるTBP-1 mRNAの発現様式を調べた。その結果、脳、心臓、脾臓、腎臓、精巣においてTBP-1 mRNAの発現を認めた。精巣では、他臓器に比べTBP-1 mRNAの発現量が多く、組織内においては精母細胞にて発現レベルが高かった。さらにTBP-1に対する抗体を作製し、免疫組織化学を行ったところin situレハイブリダイゼーション法と同様の所見を得た。
(3) Yeast two hybrid法を用い、マウスにおいてTBP-1に結合しうる因子を検索した。その結果、結合因子の候補として2クローンを精巣より同定した。その内1クローンについてcDNAのほぼ全長をクローニングした。この因子(TBP-1連関因子、TBP-1 interacting protein, TBPIP)は全長約0.9kbであり、新規因子と考えられ、精巣においてTBP-1と同一細胞に局在するものであった。さらに、CATアッセイの結果、TBP-1とTatに対する作用を増強する、すなわちTBP-1のTatを介したHIV転写活性抑制作用を増強する働きが確認された。

Report

(1 results)
  • 1996 Annual Research Report

URL: 

Published: 1996-04-01   Modified: 2016-04-21  

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