Project/Area Number |
08878174
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Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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Allocation Type | Single-year Grants |
Research Field |
Biomedical engineering/Biological material science
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Research Institution | Yamaguchi University |
Principal Investigator |
村田 智昭 山口大学, 医学部, 助手 (50263778)
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Project Period (FY) |
1996
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Project Status |
Completed (Fiscal Year 1996)
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Budget Amount *help |
¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Fiscal Year 1996: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
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Keywords | ヘパトゾーン・カニス / ガモント形成カプセル / 抗原性 |
Research Abstract |
1.Hepatozoon cains感染犬から血液を採取し、gamontを感染好中球から分離する実験 NNN培地あるいはダニ細胞培養用培地を用い、27度で培養した。その上清にはほとんどgamontの遊離を認めなかった(今回の補助金で新規購入したインキュベータ-および倒立顕微鏡を利用できた)。 2.gamontに抗原性があるかどうか? 1.の結果よりgamontを分離せず、直接抗体を反応させる実験を行った。buffy coatよりプレパラートに塗抹した。これをメタノールあるいはアセトン固定し、別のH.canis感染犬から採取した血清を反応させた。その後、間接蛍光抗体法あるいはABC染色により確認する実験を行った。gamont周囲に蛍光を発色するものが散見されたが、必ずしもほとんど全部のgamontには認められなかった。 3.H.canis感染犬の脾、腸間膜リンパ節および骨髄からschizontを分離する実験 臓器を細切し、軽く圧平し、MEMあるいはRPMI1640を用い、37度のCO2インキュベータ-で培養した(今回の補助金で新規購入した倒立顕微鏡を利用できた)。数日間の培養では上清中にschizontあるいはmerontの遊離はほとんど確認されなかった。 上記の成績より、gamont周囲のカプセルにはある程度の抗原性があるように思われた。今後、感染時期(あるいはgamont出現時期)前後の血清(抗体)を用いた実験をする必要があろう。また臓器をホルマリン固定しており、これを用いて抗体の確認を行いたいと考えている。gamontあるいはschizontの遊離実験では近縁原虫に用いられている培地を応用したが、最適培地を探すのも今後の検討課題であろう。マウスに接種する実験は、gamontを純粋に分離できなかったので本年度は中止した。
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