トリプルターゲティングによるがん細胞に特異的な核内転写抑制システムの構築

• Project/Area Number: 10145242
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Institution: The University of Tokushima
• Principal Investigator: 原島 秀吉 徳島大学, 薬学部, 助教授 (00183567)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大熊 芳明 大阪大学, 細胞生体工学センター, 助教授 (70192515) ; 篠原 康雄 徳島大学, 薬学部, 助教授 (60226157)
• Project Period (FY): 1998
• Project Status: Completed (Fiscal Year 1998)
• Budget Amount: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000); Fiscal Year 1998: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
• Keywords: 薬物送達システム / リソリーム / PCR / 核移行シグナル

Research Abstract

本年度は,研究代表者は研究分担者と協力して,
(1) キャリアーとしてのリポソームの特性の最適化に成功し(Third International Symposium on Measurement and Kinetics of In vivo Drug Effects(招待講演),オランダ,1998年),(2) pH-sensitive liposomesと核移行シグナルの付与により,高分子を細胞外から核内へ選択的に送達することに成功した(Biochem.Biophys.Res.Comm.251:538-544,1998).さらに,核への選択的なDNAの送達に着手した.
しかしながら,核内へ送達されたDNA量を評価する系が確立されていないため,その方法の開発に着手した.
(3) 我々はPCRを応用することにより,核一個あたりに導入されたプラスミドの数を定量可能な方法を確立することに成功した(橘ら,第13回日本薬物動態学会,11月).本法の確立により,遺伝子の核内送達量と発現量との関係が明らかとなり,著しい飽和性の存在が明らかとなった.本定量法は細胞内動態の最適化を行うための有用な手段となる.更に,(4) TFIIHに対するリガンドを設計し,CTD-配列に対応したペプチドを3回繰り返した構造をもつ阻害リガンドを合成した.その転写阻害活性をin vitro再構築系において検討したところ,阻害効果を確認することに成功した.
これらの研究成果に基づいて,次年度は細胞系での転写抑制を可能とするキャリアーの設計に入る予定である.

Research Products

• [Publications] 浦上裕美子 他: "リポソームによる抗癌剤の抗腫瘍効果の最適化に関する速度論的研究:生理学的モデルに基づいたシミュレーションスタディー" Drug Delivery System. 12. 403-408 (1997)
• [Publications] R.Tachibana et al.: "Intracellular regulation of macromolecules using pH-sensitive liposomes and nuclear localization signal:Quantitative and aualitative evaluation" Biochem.Biophys.Res.Comm.251. 538-544 (1998)
• [Publications] 原島秀吉 他: "キャリアーによる細胞内デリバリー戦略と今後の課題" Drug Delivery System. (1999)
• [Publications] Y.Shinohara et al.: "Source of ATP for hexokinase-catalized glucose phosphorylation in tumor cells" Biochim.Biophys.Acta. 1319. 319-330 (1997)
• [Publications] Y.Shinohara et al.: "Quantitative daterminations of the steady state transcript levels of hexokinase isozymes and glucose transporter isomers in normal rat" Biochim.Biophys.Acta. 1368. 129-136 (1998)
• [Publications] T.Okamoto et al.: "Analysis of the role of TFIIE in transcriptional regulation through structure function studies of the TFIIE β subunit" J.Biol.Chem.273. 19866-19876 (1998)