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亜鉛フィンガーモチーフによるDNA認識と遺伝子ターゲティング

Research Project

Project/Area Number 12019236
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

杉浦 幸雄  京都大学, 化学研究所, 教授 (40025698)

Project Period (FY) 2000
Project Status Completed (Fiscal Year 2000)
Budget Amount *help
¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Fiscal Year 2000: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
Keywords亜鉛フィンガー / 転写因子 / モチーフ / DNA認識 / 遺伝子制御 / ターゲティング
Research Abstract

亜鉛フィンガー型DNA結合モチーフは、一つのモチーフが3塩基ずつ認識するモジュールの連結体として見ることができ、この特徴的なDNA認識様式は新たなDNA結合分子の設計に極めて有用である。ヒト由来の転写因子SplのDNA認識部位を構成する亜鉛フィンガーの(Cys)_2(His)_2ドメインの中で、2つのCysをHiS残基に置換した(His)_4ドメインを有する新規人工亜鉛フィンガーペプチドを設計・創製した。(His)_4型SPlが新しいDNA認識能をもつ金属モチーフとして価値があるかどうかについて検討するため、円二色性スペクトルとNMRスペクトルを用いて構造化学的な面を、また、各種電気泳動法を用いて機能化学的な面を明らかにした。その結果、新規(His)_4ドメインは天然型と同様のββα構造をとり、GCボックスDNAに結合することがわかった。さらに、メチル化干渉法により、塩基認識様式も天然型に近いことが判明した。本知見は、初めて創製された(His)_4SplがDNA認識能を有する新規金属フィンガーとして有望であること、また、生物界において未発見である(His)_4型亜鉛フィンガーが自然界に存在しているかも知れないことを暗示している。

Report

(1 results)
  • 2000 Annual Research Report
  • Research Products

    (3 results)

All Other

All Publications (3 results)

  • [Publications] M.Imanishi: "DNA bending finger.Artificial design of 6-zinc finger peptides with polyglycine linkerand induction of DNA bending"Biochemistry. 39・15. 4383-4390 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Y.Hori: "Artificial zinc finger peptide containing a novel His_4 domain"J.Am.Chem.Soc.. 122・32. 7648-7653 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] M.Nagaoka: "Artificial zinc finger peptides : Creation, DNA recognition, and gene regulation"J.Inorg.Biochem.. 82・1-4. 57-63 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report

URL: 

Published: 2000-04-01   Modified: 2016-04-21  

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