マウス初期発生におけるWntシグナルの受容機構の解析
| Project/Area Number |
12026216
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
高田 慎治 京都大学, 大学院・理学研究科, 教授 (60206753)
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| Project Period (FY) |
2000
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2000)
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| Budget Amount *help |
¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Fiscal Year 2000: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
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| Keywords | 発生 / 受容体 / マウス / Frizzled / 細胞間相互作用 / Wnt |
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| Research Abstract |
脊椎動物には少なくとも18個のWntが存在し、その受容体としてはFrizzledが考えられているが。直接的な証明はまだない。本研究では、我々がクローニングした新規Frizzled遺伝子に着目し、その発現パターンの解析、Wntタンパク質に対する結合能の解析、ならびにノックアウトマウスの表現型の解析から、このFrizzled遺伝子がWntの受容体として機能しているかどうかについて検討した。マウス胚における発現パターンの解析の結果、この遺伝子の発現はWnt-3aを含む多くのWnt遺伝子の発現と良く対応していた。次に、Frizzled-10が実際にWntタンパク質と物理的に相互作用するかどうかを調べるため、HEK293細胞にFrizzled-10遺伝子の細胞外ドメインおよびWnt-3a遺伝子を強制発現し免疫沈降したところ、両者が共沈することが確認され、Frizzled-10はその細胞外ドメインを介してWnt-3aと結合する能力があることが示された。さらに、Frizzled-10ノックアウトマウスを作製しその表現型を解析したところ、ホモ変異体はほぼメンデルの法則に沿った比率で出生したが、ほとんど個体でWnt-3a変異体マウスの表現型である尾の屈曲が観察された。以上のことからFrizzled-10がマウスの形態形成過程においてWnt-3a受容体として働いている可能性が示唆された。しかしながら、ここで観察されたFrizzled-10ホモ変異体におけるWnt-3a変異体様の表現型は、その機能を完全に欠失させた変異体(null allele)のものに比べ軽微であり、実際の発生過程においてはFrizzled-10以外にもWnt-3a受容体として働いている分子があることが考えられた。
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Report
(1 results)
Research Products
(6 results)
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[Publications] Takeda,K.,Yasumoto,K,Takada,R.,Takada,S.,Watanabe,K.,Udono,T.,Saito,H.,Takahashi,K.,Shibahara,S.: "Induction of melanocyte-specific microphthalmia-associated transcription factor by Wnt-3a"J.Biol.Chem.. 275. 14013-14016 (2000)
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[Publications] Takeuchi,S.,Takeda,K.,Oishi,I.,Nomi,M.,Ikeya,M.Itoh,K.,Tamura,S.,Ueda,T.,Hatta,T.,Otari,H.,Terashima,T.,Takada,S.,Yamamura,H.,Akira,S.& Minami,Y.: "Mouse Ror2 receptor tyrosine kinase is requird for the heart development and limb formation."Genes Cells. 5. 71-78 (2000)
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[Publications] Sakamoto,I.,Kishida,S.,Fukui,A.,Kishida,M.,Yamamoto,H.,Hino,Si.,Michiuo,T.,Takada,S.,Asashima,M.,& Kikuchi,A.: "A novel beta-catenin-binding protein inhibits beta-catenin-dependenttcf activation and axis formation."J Biol Chem.. 275. 32871-32878 (2000)
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[Publications] Hinoi,T.,Yamamoto,H.,Kishida,M.,Takada,S.,Kishida,S.,& Kikuchi,A.: "Complex Formation of Adenomatous Polyposis Coll Gene Product and Axin Facilltates Glycogen Synthase Kinase-3 beta-dependent Phosphorylation of beta-Catenin and Down-regulates beta-Caternin"J Biol.Chem.. 275. 34399-34406 (2000)
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[Publications] Hino,S.-I.,Kishida,S.,Michiue,T.,Fukui,A.,Sakamoto,I.,Takada,S.,Asashima,M.& Kikuchi,A.: "Inhibition of the Wnt signaling pathway by Idax, a novel Dvl-binding protein."Mol.Cell.Biol.. 21. 330-342 (2001)
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