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ロドコッカス・エクイ強毒株の二次元電気泳動による蛋白質マッピング

Research Project

Project/Area Number 12760217
Research Category

Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Applied veterinary science
Research InstitutionKitasato University

Principal Investigator

角田 勤  北里大学, 獣医畜産学部, 助手 (80317057)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 高井 伸二  北里大学, 獣医畜産学部, 助教授 (80137900)
椿 志郎  北里大学, 獣医畜産学部, 教授 (70050507)
Project Period (FY) 2000 – 2001
Project Status Completed (Fiscal Year 2001)
Budget Amount *help
¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
Fiscal Year 2001: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2000: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Keywordsロドコッカス・エクイ / 液性免疫応答 / 病原性プラスミド / 二次元電気泳動法
Research Abstract

ロドコッカス・エクイの病原性にプラスミドが関与していることが知られている。この病原性プラスミド上にはVap(virulence associated protein)遺伝子群が存在しており、前年度の結果から少なくともVapA, VapCおよびVapDはin vivoで発現し、宿主により認識されていることが示唆された。本年度は、VapAならびにVapDのワクチン標的分子としての可能性を検討する目的で以下の実験を行った。
【マウスを用いた実験系】VapAのB細胞エピトープ、T細胞エピトープのそれぞれ、あるいは双方を含む合成ペプチド(ハイブリッドペプチド)、および組み換えVapDにてマウスを免疫し、抗体応答測定と感染防御試験を行った。B細胞エピトープを含むペプチド、ハイブリッドペプチドで最終免疫後にIgGlとIgMの上昇が確認された。ロドコッカス・エクイ強毒株の攻撃感染を行ったところ、脾臓と肺の菌数に減少傾向が見られたが、対照群と比べて有為な差はなかった。組み換えVapD免疫マウスにおいてもIgGlとIgMの上昇が確認されたが、免疫マウスは強毒株による攻撃感染に対して防御されなかった。
【ウマを用いた実験系】ロドコッカス・エクイの自然宿主であるウマを用いて上述のマウスと同様免疫をおこない、それぞれの抗原に対する抗体応答を調べた。ハイブリッドペプチド免疫馬では、IgGbが上昇し、続いてIgGaが上昇した。組み換えVapD免疫馬では、IgGaとIgGbが同時期に上昇したが、IgGaの上昇がより顕著であった。
【総括】病原性プラスミド上にコードされているVap遺伝子群のうち、、VapA, VapC, VapDは宿主であるウマに特異的な液性免疫応答を惹起することが判明した。今回の実験では免疫マウスではVapAならびにVapDに対して液性免疫応答を誘導することができたが、有為な感染防御は見られなかった。その理由としてロドコッカス・エクイはマクロファージ内で増殖する細胞内寄生菌であることから、液性免疫よりも細胞性免疫が重要な役割を担っているものと考えられた。したがって今後はDNAワクチンなど細胞性免疫応答を惹起する免疫方法の検討が必要であると考えられた。

Report

(2 results)
  • 2001 Annual Research Report
  • 2000 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All Other

All Publications (7 results)

  • [Publications] Takai, S(9名中6番目): "Prevalence of virulent Rhodococcus equl in soil from five R. equl-endemic horse-breeding farms and restriction fragment length polymorphisms of virulence plasmids in isolates from soil and infected foals in Texas"J Vet Diagn Invest.. 13(6). 489-494 (2001)

    • Related Report
      2001 Annual Research Report
  • [Publications] Kakuda T.: "Epitope-Mapping of antigen-specific T lymphocyte in cattle immunized with recombinant major piroplasm surface protein of Theileria sergenti"J Vet Med Sci.. 63(8). 895-901 (2001)

    • Related Report
      2001 Annual Research Report
  • [Publications] Takai, S(7名中5番目): "Two new variants of the Rhodococcus equi virulence plasmid, 90 kb type III and type IV, recovered from a foal in Japan"Vet Microbiol.. 82(4). 373-381 (2001)

    • Related Report
      2001 Annual Research Report
  • [Publications] Takai, S(7名中5番目): "Isolation of virulent Rhodococcus equi from native Japanese horses"Comp Immunol Microbiol Infect Dis.. 24(2). 123-133 (2001)

    • Related Report
      2001 Annual Research Report
  • [Publications] Takai,S.: "DNA sequence and comparison of virulence plasmids from Rhodococcus equi ATCC 33701 and 103."Infect.Immun.. 68. 6840-6847 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Takai,S.: "Isolation of virulent Rhodococcus equi from native Japanese horses."J.Equine Sci.. 11. 7-14 (2000)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report
  • [Publications] Takai,S.: "Isolation of virulent Rhodococcus equi from native Japanese horses."Comp.Immun.Microbiol.Infect.Dis.. 24. 123-133 (2001)

    • Related Report
      2000 Annual Research Report

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Published: 2000-04-01   Modified: 2016-04-21  

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