Ablation耐性MCF-7細胞に認められる細胞内高エストラジオールの機序

• Project/Area Number: 12770662
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: General surgery
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 戸倉 英之 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00306721)
• Project Period (FY): 2000 – 2001
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2001)
• Budget Amount: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000); Fiscal Year 2001: ¥100,000 (Direct Cost: ¥100,000); Fiscal Year 2000: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
• Keywords: estradiol / aromatase / 17beta-HSD / real time RT-PCR / アロマターゼ / サルファターゼ / アロマターゼインヒビター / サルファターゼインヒビター / 17β-HSD / エストラジオール

Research Abstract

1.細胞・組織内estradiol濃度に影響を与える腫瘍内酵素であるaromatase,17beta-HSD(type1,2,4,7,8)を特異的に認識するPCR Primerを作成し、タンパクレベルでは、酵素活性を測定、m-RNAレベルでは、real time RT-PCRにて定量を行っている。測定に関しては、過去の手術時に冷凍保存されている閉経後の乳癌患者組織約50検体を使用している。
2.Ablation耐性MCF-7においては、当初親株に比べ約10倍高濃度の細胞内estradiolが認められたが、その後の追加実験では再現性に乏しく(2〜5倍)、また別のablation耐性クローンでは、親株との間に細胞内estradiol濃度の明らかな相違が認められず、現在追試実験を行っている。一方、ablation耐性MCF-7をaromatase inhibitorで処理しても、細胞内estradiol濃度、細胞増殖に影響は認められなかった。また、sulfatase inhibitorを用いると細胞増殖を抑制したが、この際、細胞内estradiolが著しく高濃度になっていたこと、親株では増殖が亢進したこと、sulfatase inhibitorの構造が、estrogenに類似していることから、高濃度のsulfatase inhibitorが、estradiolに分解されることで、細胞に高濃度のestradiol(10-6M)を添加した際と類似の機序で細胞増殖抑制をしたものと考えられ,ablation耐性MCF-7におけるsulfataseの役割は確認できなかった。
3.細胞内estradiol濃度が一定しないため、放射能標識した前駆物質を用いてのtracer実験および取り込み実験は、現在見合わせている。