歯周組織におけるサブスタンスPの機能とその受容体の挙動

• Project/Area Number: 12771087
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Morphological basic dentistry
• Research Institution: Kyushu University
• Principal Investigator: 城戸 瑞穂 九州大学, 歯学研究院, 助手 (60253457)
• Project Period (FY): 2000 – 2001
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2001)
• Budget Amount: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000); Fiscal Year 2001: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000); Fiscal Year 2000: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
• Keywords: 歯肉 / ラット / サブスタンスP / 細胞培養 / 口腔上皮 / サブスタンスPレセプター / 歯周組織 / 培養細胞

Research Abstract

神経ペプチドのサブスタンスP(SP)は痛みを主体とした侵害刺激の伝達物質として、さらに細胞増殖や免疫反応、神経原性炎症(SPが神経終末より放出されることにより、血管透過性亢進や血管拡張、炎症細胞などの浸出が引き起こされること)のメディエーターとしても作用していることが知られている。このSP含有の神経は歯肉上皮に密に分布していることがわかっているが、歯周組織における働きについては不明である。そこで、以下の実験を行った。
1.歯周組織における神経ペプチドSPの影響の検索
6週齢のSDラット臼歯部歯肉にSPを滴下し、局所塗布30分後に灌流固定、あるいは頸静脈内にSPを注入し5分後に灌流固定を行った。形態学的あるいは免疫組織化学的手法により光学顕微鏡、共焦点レーザー顕微鏡、あるいは電子顕微鏡で観察した。すると、SPの塗布の結果、付着上皮内へと遊走している好中球の数が増えていること、好中球が脱顆粒をおこし、放出された顆粒を付着上皮細胞が取り込んでいるような像が観察された。これらが、SPレセプターを介したものかどうかを調べるためにSPの拮抗薬の投与を行った。色々な条件設定を試したが、現在使っている拮抗薬ではまだはっきりとした結果は得られなかった。
2.歯肉上皮細胞の培養
歯肉上皮細胞の機能を調べるために、初代培養細胞の樹立を目指して、生後2-5日齢のラットロ腔粘膜より上皮組織を採取し、口腔上皮細胞の培養を試みた。色々な条件を試した結果、上皮細胞の培養が可能となり、増殖率や細胞移動の程度、サイトケラチンの染色動態による分化程度の検索、接着分子の発現などを調べた。さらに、この細胞がSPの受容体を発現していることが明らかとなった。