変異Gsα遺伝子を有する骨原性細胞株の樹立とその性状の解析

• Project/Area Number: 12771224
• Research Category: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Surgical dentistry
• Research Institution: The University of Tokushima
• Principal Investigator: 新田 幸司 徳島大学, 歯学部・附属病院, 助手 (00314881)
• Project Period (FY): 2000 – 2001
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2001)
• Budget Amount: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000); Fiscal Year 2001: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000); Fiscal Year 2000: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
• Keywords: 線維性骨異形成症 / 化骨性線維腫 / Gsα遺伝子 / 遺伝子変異 / 骨芽細胞 / 骨髄間質細胞 / 骨形成 / 線維性骨異形性症

Research Abstract

多骨性の線維性骨異形性症Fibrous dysplasia(FD)は若年者にみられる良性の骨腫瘍類似疾患であり、これに性早熟や色素沈着を併発するMcCune-Albright症侯群においては、GSαタンパク質のArg^<201>のHisあるいはCysへの変異が成因とされている。今回、顎骨に発生する単骨性FDおよび類似した所見を示す化骨性線維腫Ossifying fibroma(OF)について両疾患由来の骨芽細胞を用い、その成因につき細胞生物学的検討を行った。
9、12歳女性FD患者と37歳OF患者の病変部および骨系統疾患を有しない11、14歳女性の腸骨海綿骨より骨芽細胞を分離し、mutant allele-specific amplification(MASA)法によりGsα遺伝子変異の有無について検討を加えた。さらに細胞内cAMPの定量、アルカリ性フォスファターゼ(ALPase)溶性の測定、Alizarin Redおよびvon Kossa染色による石灰化能の検討を併せて行った。
いずれの疾患の骨芽細胞においてもGsαタンパク質のArg201のHisへの遺伝子変異を認めた。正常細胞に比べcAMP産生量はフォルスコリン処理による増加率が小さく、メラトニン処理による低下率は大きかったった。また、ALPase活性や石灰化能の低下を認めた。以上より、顎骨における単骨性FDおよびOFにおいても、それらの発症にGsα遺伝子の変異が関与する可能性が示唆された。
また、現在SV40 large T antigenを用いたGsα変異株の樹立を目指した研究を進行中である。