プリオン蛋白構造変換機構への分子認識的アプローチ

Research Project

Project/Area Number	12771440
Research Category	Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	医薬分子機能学
Research Institution	The Institute of Physical and Chemical Research
Principal Investigator	岩浪直子 (齋藤直子) 理化学研究所, 神経蛋白制御研究チーム, 基礎科学特別研究員 (90283077)
Project Period (FY)	2000 – 2001
Project Status	Completed (Fiscal Year 2001)
Budget Amount *help	¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000) Fiscal Year 2001: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000) Fiscal Year 2000: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Keywords	プリオン / 相互作用 / スクリーニング / 蛋白構造変換
Research Abstract	プリオン病は、正常な生体内に存在しα-helixに富むプリオン蛋白PrP^cが、感染性のβ-sheetに富むPrP^<Sc>へと構造変換することが感染、発症と密接に関係するとされている。その過程には正常型PrP^c蛋白と病原型PrP^<Sc>蛋白との相互作用が必要である。本研究は、この蛋白間相互作用部位に結合する物質には、接触阻害による構造変換の阻害効果が期待できると考え、構造変換機構の解明に寄与するプローブとして、また治療薬創製のためのリード化合物として役立つ化合物を得ることを目的とする。 (1)プリオン蛋白結合性物質スクリーニングプリオン蛋白の部分ペプチドPrP(106-126)を用いたELISAアッセイ系を構築し、薬用植物、微生物培養液などから結合物質のスクリーニングを行った。薬用植物から2種、微生物培養物から1種、高い結合活性を示したサンプルについて、活性物質の単離、構造決定を進めている。 (2)プリオン蛋白結合の選択性の検討生体分子間相互作用解析装置を用いてより直接的な相互作用解析を行った。プリオンペプチドと同じアミノ酸組成で配列を変えたスクランブルペプチドとの比較により、プリオンペプチドへの結合特異性を調べたところ、一部のクロロフィル誘導体および微生物培養物から得られた活性フラクションに結合の特異性が認められた。 (3)プリオン結合物質の作用によるプリオン蛋白構造変換に対する効果スクレイピー感染細胞ScN2aによるPrP^c→PrP^<Sc>構造変換アッセイ系を用い、プリオン蛋白構造変換に対する効果を調べたところ、本研究で得られたプリオン結合活性物質にはSc型への構造変換を阻害する効果が認められた。 (4)プリオンペプチドの高次構造への影響 CDスペクトルを用いたペプチド鎖の二次構造解析を行い、本研究で得られた結合物質がプリオンペプチドの構造に与える影響の解析が進行中である。