重症先天性無顆粒球症におけるG-CSF受容体とSTAT3分子の遺伝子変異解析

• Project/Area Number: 12877122
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Pediatrics
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 今泉 益栄 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (40191895)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉成 みやこ 東北大学, 医学部・附属病院, 助手 (50302104)
• Project Period (FY): 2000
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2000)
• Budget Amount: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000); Fiscal Year 2000: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
• Keywords: 重症先天性無顆粒球症 / G-CSF受容体 / アポトーシス / 遺伝子変異

Research Abstract

(1)G-CSF受容体の変異解析:
重症先天性無顆粒球症(SCN)患児3症例においてG-CSF受容体(G-CSFR)の変異の有無をRT-PCR-SSCPを用いて解析した。細胞内ドメインの解析では、3例全症例で移動度の異なるバンドを認めず、変異は存在しないと判断された。一方、細胞外ドメインのRT-PCR法による解析では、1症例で異常はサイズの増幅が認められた。現在、患児EBV-transform B細胞株を用いてゲノム上での解析を行っている。
(2)STAT3分子の異常解析:
SCNの病態に関与するSTAT3の解析をUF-1細胞株を用いて行った。[方法]UF-1はG-CSFおよびIL-6刺激によりアポトーシスが誘導されること(Yoshinari et al.Tohoku J Exp Med 189:71,1999)から、G-CSFとIL-6シグナル伝達の共通分子であるSTAT3蛋白の発現および活性化(リン酸化)を検討した。APL細胞対照としてNB4、サイトカイン対照としてGM-CSF,IL-3を用いた。[結果]G-CSFあるいはIL-6刺激時にUF-1のSTAT3の過剰な活性化が認められた。この所見は、GM-CSFあるいはIL-3刺激UF-1、およびサイトカイン刺激NB4には認められなかった。[考察]G-CSF伝達経路でのSTAT3活性がG-CSFによるアポトーシス制御に深く関与していることが示唆された。

Research Products

• [Publications] Kudo S et al.: "Increased HbF levels in dyserythropoiesis."Clin Chim Acta. 291. 83-87 (2000)
• [Publications] Fujii K et al.: "Mutation detected by TaqMan-allele specific amplification : its application to the molecular diagnosis of glycogen storage disease type la and medium-chain acyl-CoA dehydrogenase deuciency."Hum Mutation. 15. 189-196 (2000)
• [Publications] Fujimaki S et al.: "A quantitaive reverse transcriptase polymerase chain reaction method for the detection of leukemic cells with t(8;21)in peripheral blood."Eur J Haematol. 64. 252-258 (2000)
• [Publications] Sakamoto O et al.: "Hypercalcemia due to all-trans retinoic acid therapy for acute promyelocytic leukemia : a case report of effective treatment with bisphosphonate."Pediatir International. (in press).
• [Publications] Miura T et al: "Childhood T-cell acute lymphoblastic leukemia with four distinct immunophenotypes representing different stages of T-cell development."Pediatr Hematol Oncol. (in press).
• [Publications] Suzuki H et al.: "Monitoring of minimal residual disease in children with acute promyelocytic leukemia by RT-PCR detecting PML/RARa chimeric gene : a retrospective study of clinical feasibility."Tohoku J Exp Med. (in press).