後腎間葉細胞移植による多発性嚢胞腎治療の試み

• Project/Area Number: 13770404
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Pediatrics
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 藤田 尚代 慶應義塾大学, 保健管理センター, 助手 (90296624)
• Project Period (FY): 2001 – 2002
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2002)
• Budget Amount: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000); Fiscal Year 2002: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2001: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
• Keywords: 多発性嚢胞腎 / 細胞増殖 / ERK / Pax2 / TGF-β1 / 尿管芽細胞 / 周期的進展 / MAPキナーゼファミリー / p38 MAPキナーゼ / 培養マウス尿管芽細胞 / 周期的伸展

Research Abstract

多発性嚢胞腎は腎不全に至る重篤な遺伝性腎疾患である。嚢胞発生機序として嚢胞上皮細胞の異常増殖が示唆されている。細胞内シグナル伝達における中枢的酵素MAPキナーゼファミリーの一つであるextracellular signal-regulated kinase(ERK)は胎児腎に発現し、ネフロン形成に必要な酵素である。また異形成腎には尿路閉塞が高率に合併する。ヒト多嚢胞性異形成腎およびヒツジ胎仔尿路閉塞モデル腎の嚢胞、異形成尿細管においてERKの発現・活性が増加している。尿管芽由来の異形成上皮では細胞増殖が亢進し、転写因子Pax2、サイトカインTGF-β1の発現が亢進していることが知られている。尿路閉塞の流体力学的変化を、培養マウス尿管芽細胞を周期的伸展(20%、20サイクル/分)および非伸展下で培養することによりin vitroで再現し、ERK活性、細胞増殖、Pax2、TGF-β1発現への影響を検討した。ImmunoblotによりERK、抗活性型ERK、Pax2発現を、BrdU取込みにより細胞増殖を評価した。またTGF-β1 mRNAをRT-PCR法により測定した。ERKは周期的伸展刺激により時間依存性に活性化された。Pax2蛋白発現も時間依存性に増加したがMEK阻害剤PD98059存在下で抑制された。BrdU取込み、TGF-β1 mRNAは24時間伸展で有意に増加したが、MEK阻害により対照と同レベルに抑制された。以上、周期的伸展は尿管芽細胞においてERK活牲化宙介した細胞増殖およびPax2、TGF-β1 mRNA発現を誘導した。ERKの活性化が胎児期尿路閉塞による嚢胞形成に関与する可能性が考えられる。