経皮的遺伝子導入法の最適化とDNAワクチンへの応用

• Project/Area Number: 13770463
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Dermatology
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 長谷川 正規 名古屋市大, 医学部, 助手 (20326151)
• Project Period (FY): 2001 – 2002
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2002)
• Budget Amount: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000); Fiscal Year 2002: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000); Fiscal Year 2001: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
• Keywords: プラスミド / needle free jet injection / intradermal needle injection / DNAワクチン / 腫瘍免疫 / 経皮的遺伝子導入

Research Abstract

我々はルシフェラーゼ遺伝子(Luc)をコードしたプラスミドを用い,needle free jet injectionにてプラスミドを導入する実験を行ってきた.今回の我々の行った実験のデータではneedle free jet injectionによってマウス皮膚へ打ち込んだ際のルシフェラーゼ活性は,intradermal needle injectionによるマウス皮膚でのプラスミド投与の際のルシフェラーゼ活性とほぼ同等であった.経皮的遺伝子導入の最適化するためにintradermal needle injection, needle free jet injection,密封法(ODT)で最も最適な条件はintradermal needle injection, needle free jet injection,ではともに12時間後がルシフェラーゼ活性が最大で,密封法(ODT)ではほとんどルシフェラーゼ活性が認められなかった.プラスミドの量はintradermal needle injection, needle free jet injection,でともに一回に100μgが最大となった.GFPをコードしたプラスミドを用いて蛍光顕微鏡にて導入した結果,intradermal needle injectionでは表皮にび漫性に発現しており,needle free jet injectionでは表皮にfocusに強い発現を認めた.さらにAntibody assasyでもintradermal needle injection, needle free jet injectionともに同等の抗体の発現を認めた.今後特異的なCTL誘導を目指して研究を続けていきたい.