新規情報伝達分子ＰＲＩＰの骨代謝制御における機能解析
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13J01683
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| Research Category |
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 国内 |
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| Research Field |
Functional basic dentistry
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
小谷 美穂 九州大学, 歯学研究院, 特別研究員(PD)
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| Project Period (FY) |
2013-04-01 – 2015-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2014)
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| Budget Amount *help |
¥2,070,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2014: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2013: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
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| Keywords | PRIP / BMP / Smad / Presteoblast / BMPシグナル伝達経路 / Smad1 / BMP受容体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
骨代謝におけるPRIPの機能を分子レベルで解明することを目的とし、野生型およびPRIP-KOマウスにおけるBMPシグナル伝達の比較を行った。１）BMP刺激により、BMP 受容体(BMPR1A および BMPR2)が複合体を形成することでメチル基転位酵素であるPRMT1 が BMPR1A上の Smad6 をメチル化する。その結果、Smad6 はPRMT1と BMPR1A から解離し、 BMPR1A はSmad1 を活性化するという報告がある（Mol Cell 51:5-19）。そこで、この過程に RPIP が関与しているか検討するために PRMT1 の阻害剤であるDB867 を用いて、野生型(WT)および PRIP-KO(KO)の新生マウスの頭蓋骨由来細胞（preosteoblast, POB）における Smad1 のリン酸化程度について調べた。DB867 を培地に添加して POB を8時間培養後、BMP4 で30分刺激して細胞を回収し、ウェスタンブロッティングを行った。その結果、BMP4 刺激のみの場合に比べてDB867 で処理してからBMP4 で刺激した場合、WTでSmad1 のリン酸化レベルは減少し、KO はWT に比べると多少の減少にとどまった。
２）１）と同様な条件下で、Smad1 の局在についてWTおよび KO の POBの免疫染色を行ったところ、BMP4 存在下では両遺伝子型で核移行像が認められた。一方、DB867 および BMP4 存在下においては、KO で核移行が顕著であった。
３）PRIP と Smad1、Smad4、Smad6 の相互作用についてWT および KO のPOB をBMP4 で40分刺激後、細胞を回収し、免疫沈降を行った。BMP4 の存在如何に関わらず、PRIP と Smad1、Smad4、Smad6 の直接的な相互作用は認められなかった。
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| Research Progress Status |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
26年度が最終年度であるため、記入しない。
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Report
(2 results)
Research Products
(1 results)
