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バキュロウイルスにおける長鎖非コードRNAによる転写制御機構の解析

Research Project

Project/Area Number 13J03128
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Applied entomology
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

石原 玄基  東京大学, 農学生命科学研究科, 特別研究員(DC2)

Project Period (FY) 2013-04-01 – 2015-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2014)
Budget Amount *help
¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 2014: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 2013: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Keywordsバキュロウイルス / 長鎖非コードRNA / DNAウイルス / ウイルス増殖 / 経口感染力 / 転写制御 / 経口感染 / 組織特異性
Outline of Annual Research Achievements

本研究では、バキュロウイルスのゲノムから転写されている新しいクラスの長鎖非コードRNAのウイルス感染時における機能を解析し、厳密なウイルス遺伝子の転写制御における役割を明らかにすることを目的としている。そのために、バキュロウイルスゲノム由来の長鎖非コードRNAの機能解析を網羅的に実施した。手法としては、個々の非コード転写物に対してプロモーターノックアウトウイルス(PKOウイルス)を構築し、ウイルス遺伝子の発現制御と高次宿主制御との関連を調査することとした。組換えウイルスの作成は培養細胞における相同組換え法を用いて行い、現在までに22種のプロモーターノックアウトウイルスを構築した。
次にプロモーターノックアウトウイルスの培養細胞、及びカイコ幼虫における性状を調査した。具体的には、感染細胞において発現している転写産物に対するNorthern解析、出芽ウイルス・多角体の産生量、及び、カイコ幼虫に対する病原性(半数致死時間、および半数致死量)を調査した。
これまでに作成した22個のPKOウイルスの解析を行った結果、野生型ウイルスと比較して有意に多角体産生量が低下する1つのPKOウイルスと、経口感染力が消失する2つのPKOウイルスを見出した。これらの結果は、バキュロウイルスの長鎖非コードRNAが遺伝子発現制御や、病原性に影響を与えていることを示すものであった。続けて、それぞれの非コードRNAをコードする領域に対して詳細な解析を行った。その結果、野生型ウイルスと優位に表現型の異なった3つのPKOウイルスは、それぞれ異なった機構でウイルスの増殖・感染性に寄与している事が明らかとなった。得られた結果の一部は学会発表および、投稿論文にて発表した。

Research Progress Status

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

26年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2014 Annual Research Report
  • 2013 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2015 2014 2013

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Acknowledgement Compliant: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Functional analysis of antisense long non-coding RNAs transcribed from the Bombyx mori (Lepidoptera: Bombycidae) nucleopolyhedrovirus genome.2015

    • Author(s)
      Ishihara G, Kokusho R, Shimada T, Katsuma S.
    • Journal Title

      Applied Entomology and Zoology.

      Volume: in press Issue: 2 Pages: 155-167

    • DOI

      10.1007/s13355-014-0317-4

    • Related Report
      2014 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
  • [Journal Article] Functional characterization of Bombyx mori nucleopolyhedrovirus CG30 protein.2013

    • Author(s)
      Ishihara. G, Shimada. T, Katsuma. S
    • Journal Title

      Virus research

      Volume: 174 Issue: 1-2 Pages: 52-59

    • DOI

      10.1016/j.virusres.2013.02.014

    • Related Report
      2013 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 「バキュロウイルスの経口感染に必須なアンチセンスRNAの機能解析」、2014

    • Author(s)
      石原玄基、嶋田透、勝間進
    • Organizer
      第11回昆虫病理研究会シンポジウム
    • Place of Presentation
      山梨県 富士カーム
    • Year and Date
      2014-09-18 – 2014-09-20
    • Related Report
      2014 Annual Research Report
  • [Presentation] バキュロウイルスにおける機能性長鎖非コードRNAの解析2014

    • Author(s)
      石原 玄基
    • Organizer
      平成26年度蚕糸・昆虫機能利用学術講演会
    • Place of Presentation
      日本大学(神奈川県)
    • Year and Date
      2014-03-11
    • Related Report
      2013 Annual Research Report
  • [Presentation] バキュロウイルス由来長鎖非コードRNAの機能解析2013

    • Author(s)
      石原 玄基
    • Organizer
      第74回昆虫病理研究会
    • Place of Presentation
      東京大学(東京都)
    • Year and Date
      2013-09-24
    • Related Report
      2013 Annual Research Report

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Published: 2014-01-29   Modified: 2024-03-26  

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