細胞周期調節に関与するRNA結合蛋白質の解析

Research Project

Project/Area Number	14033253
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	The Institute of Physical and Chemical Research
Principal Investigator	松本健独立行政法人理化学研究所, 細胞生化学研究室, 先任研究員 (60222311)
Project Period (FY)	2002 – 2003
Project Status	Completed (Fiscal Year 2003)
Budget Amount *help	¥4,800,000 (Direct Cost: ¥4,800,000) Fiscal Year 2003: ¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000) Fiscal Year 2002: ¥2,400,000 (Direct Cost: ¥2,400,000)
Keywords	RNA結合蛋白質 / mRNAの安定化 / Nek2B / CIRP / HuR / アフリカツメガエル / 翻訳調節 / 細胞増殖 / 細胞周期
Research Abstract	Xenopus cold-inducible RNA-binding protein2(xCIRP2)はアフリカツメガエルの卵母細胞に存在する主要なRNA結合蛋白質の一つである。ホモログの解析から、発生の正常な進行に重要であることが示唆されているが、その分子機能は明らかにされていなかった。マウスCIRPは高発現により細胞にG1期遅延を引き起こすことが知られている。我々は酵母two-hybrid screeningにより、xCIRP2と相互作用する蛋白質としてELAV(embryonic lethal abnormal vision)familyのRNA結合蛋白質elrAをみいだした。elrAのヒトホモログであるHuRはサイトカイン等のmRNAの3'UTRに存在するAU-rich element(ARE)に特異的に結合する蛋白質であり、mRNAの安定化に関与していることが知られている。そこで我々はHeLa細胞の抽出液を用いたin vitro RNA degradation assayにより、mRNAの安定性制御におけるxCIRP2の効果を検討した。その結果、xCIRP2がAREをもつmRNAのpoly(A)鎖分解を抑制することを新たに見いだした。また卵母細胞内でxCIRP2と結合しているmRNAを検索し、いくつかのmRNAを同定した。これらには中心体に存在する蛋白質リン酸化酵素Nek2Bや、サイクリンB1のmRNAが含まれていた。Nek2B mRNAについては、in vitro RNA degradation assayにおいてAREをもつmRNAと同様に、xCIRP2によってpoly(A)鎖分解が抑制されることがわかった。これらの結果から、xCIRP2はpoly(A)鎖長を制御することで、特異的なmRNAの翻訳もしくは安定性を制御している可能性が示された。