| Project/Area Number |
14658016
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
体育学
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| Research Institution | Fukuoka University |
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Principal Investigator |
田中 宏暁 福岡大学, スポーツ科学部, 教授 (00078544)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
庄野 菜穂子 佐賀大学, 医学部, 講師 (60223674)
朔 啓二郎 福岡大学, 医学部, 教授 (40183371)
清永 明 福岡大学, スポーツ科学部, 教授 (70177955)
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| Project Period (FY) |
2002 – 2003
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2003)
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| Budget Amount *help |
¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
Fiscal Year 2003: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
Fiscal Year 2002: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
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| Keywords | 遺伝子発現 / シリンジバイオプシー / RNA / 運動 / cDNA / 骨格筋 |
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| Research Abstract |
目的:シリンジバイオプシー法によるヒト外側広筋採取と,遺伝子発現の定量解析法の開発
方法:成人男性6名を対象に、一過性運動によるHexokinase II, Glycogenin, Glut-4の遺伝子発現変化を調べる.
・運動負荷試験:最大酸素摂取量の70%の強度で60分の運動を行い,運動前,運動終了直後,運動終了180分後に2回のシリンジバイオプシーを行った.
・シリンジバイオプシー
1.18ゲージの注射針を外側広筋中央部に挿入する。
2.筋に注射針を挿入したまま、50mlのシリンジを用いて筋組織を強く吸引する。
3.強い陰圧をかけながら注射針を3回程度上下左右にゆっくり動かす。
・RNA抽出:RNA抽出試薬(Isogen:ニッポンジーン社製)にEthachinmate (Invitrogen社製)を加えてRNA抽出を行った.
・Real-time PCR:作成したcDNAを用いてHexokinase II, Glycogenin, Glut-4をReal-time PCR (LightCycler : Roche社製)にて測定した.
結果・考察・まとめ
36サンプルから得られた総RNAは平均3.80士0.71μg(範囲:5.53-2.86μg)であった.昨年の2倍の総RNAが得られたが、これはシリンジ容量を20mlから50mlに変更したため、より強い陰圧がかかり,多くの組織が得られたためと考えられる.
すべての対象者で,運動前に比べ運動終了直後もしくは180分後にGlycogenin/β-Actinが増加した.運動後に骨格筋中のGlycogeninが増加することが先行研究(Kraniou et al.J.Appl.Physiol.2000)で報告されており,今回も同様の結果が得られた.よって今回シリンジバイオプシーにて得られたサンプルは骨格筋であると考えられる.
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