イネのピリミジン二量体光回復酵素の遺伝的変異による構造変化と紫外線感受性

• Project/Area Number: 14704060
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: 環境影響評価(含放射線生物学)
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 日出間 純 東北大学, 大学院・生命科学研究科, 助教授 (20250855)
• Project Period (FY): 2002 – 2004
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2004)
• Budget Amount: ¥28,080,000 (Direct Cost: ¥21,600,000、Indirect Cost: ¥6,480,000); Fiscal Year 2004: ¥7,280,000 (Direct Cost: ¥5,600,000、Indirect Cost: ¥1,680,000); Fiscal Year 2003: ¥8,580,000 (Direct Cost: ¥6,600,000、Indirect Cost: ¥1,980,000); Fiscal Year 2002: ¥12,220,000 (Direct Cost: ¥9,400,000、Indirect Cost: ¥2,820,000)
• Keywords: 紫外線B (UVB) / 光回復酵素 / シクロブタン型ピリミジン二量体 / UVB耐性機構 / イネ / 光回復酵素遺伝子 / 突然変異 / 光回復酵素遺伝子組換え体イネ / 紫外線B(UVB) / ピリミジン二量体 / UVB耐性幾構 / 変異 / 組換え体イネ / 紫外線B / 紫外線耐性機構

Research Abstract

(1)イネのUVB感受性とCPD光回復酵素遺伝子の構造的変異、酵素特性について
UVB感受性のことなる日本型イネ17品種を材料に、UVB感受性とCPD光回復酵素遺伝子の配列、およびその酵素活性を比較した結果、(1)CPD光回復酵素の遺伝子型は126番目がGln(ササ型)とArg(農林型)の2つの型(他のアミノ酸配列は同じ)に分けられ、ササ型は酵素活性が高く、一方農林型の活性はササ型と比較して低いこと、(2)ササ型の遺伝子を有する品種はUVB抵抗性が高いことがわかり、少なくとも1塩基の変異(377番目)による126番目のアミノ酸変異が、日本型イネ品種のUVB抵抗性を決定することを明らかにした(Teranishi et al.2004)。また、UVB感受性の異なるインド型品種を材料に同様の研究を展開した結果、(1)日本型品種よりもさらに感受性を示す品種は、126番目がArgで、かつ296番目がHisであること、(2)この2つの変異は、基質であるCPDへの結合能低下させることを見出した。さらにUVB感受性の異なる日本型、インド型の後代世代を用いたQTL解析から、これらの変異がUVB感受性を決定する主要因であることを実証した(Hidema et al.2005)。
(2)光回復酵素遺伝子組換え体イネを用いた、光回復酵素とUVB感受性に関する研究
イネ・ササニシキの光回復酵素遺伝子をササニシキ、および農林1号に1コピー導入した形質転換体、および数コピー導入した過剰発現組換え体、ならびにアンチセンスイネを各々数系統作成し、T2、T3種子を獲得した。現在、これら組換え体のUVB感受性試験、発現量・酵素活性解析を行っている。

Research Products

• [Journal Article] Changes in grain size and grain storage protein of rice (Oryza sativa L.) in response to elevated UV-B radiation under outdoor conditions. (2005)
  • Author(s): J.Hidema
  • Journal Title: Journal of Radiation Research 46(in press)
  • NAID: 110004041109
• [Journal Article] Significance of anthocyanins and UV-absorbing compounds in UV-B-induced cyclobutane pyrimidine dimers and their photorepair in purple rice (Oryza sativa L.). (2005)
  • Author(s): M.Teranishi
  • Journal Title: Recent Research Developments in Photochemistry and Photobiology 8(in press)
• [Journal Article] Spontaneously occurring mutations in the cyclobutane pyrimidine dimer photolyase gene cause different sensitivities to ultraviolet-B in rice. (2005)
  • Author(s): J.Hidema
  • Journal Title: The Plant Journal (in press)
  • NAID: 130006992163
• [Journal Article] Ultraviolet-B sensitivities in Japanese lowland rice cultivars : cyclobutane pyrimidine dimer photolyase activity and gene mutation. (2004)
  • Author(s): M.Teranishi
  • Journal Title: Plant & Cell Physiology 45 Pages: 1848-1856
• [Journal Article] UVB sensitivity and CPD photolyase gene mutation in rice plnat (2004)
  • Author(s): J.Hidema
  • Journal Title: Photomedicine and Photobiology 26 Pages: 11-12
• [Book] 化学と生物 Vol.43, No.2 (2005)
  • Author(s): 岩松 優
  • Publisher: 日本農芸化学会会誌 学会出版センター
• [Publications] H.Hada: "Higher amounts of anthocyanins and UV-absorbing compounds effectively lowered CPD photorepair in purple rice (Oryza sativa L.)."Plant & Cell Environment. 26. 1691-1701 (2003)
• [Publications] T.Hirouchi: "A gene for a Class II DNA photolyase from Oryza sativa : cloning of the cDNA by dilution-amolification."Molecular Genetics and Genomics. 269. 508-516 (2003)
• [Publications] A.Takeuchi: "Changes in synthesis and degradation of Rubisco and LHCII with leaf age in rice (Oryza sativa L.) growing under supplementary UV-B radiation"Plant, Cell & Environment. 25. 695-706 (2002)
• [Publications] H.Hada: "Light environment during culture and changes in cyclobutane pyrimidine dimer levels in rice"Recent Research Developments in Photochemistry and Photobiology. 6. 1-10 (2002)
• [Publications] J.Hidema: "Physiological and biochemical analyses of rice sensitivities to UVB radiation"Journal of Photoscience. 9. 162-165 (2002)
• [Publications] M.Teranishi: "Differences in amino acid sequences of CPD photolyase between UV-sensitive and UV-resistant rice cultivars"Journal of Photoscience. 9. 329-331 (2002)
• [Publications] A.Takeuchi: "Effects of supplementary UV-B radiation on growth and protein biosyntheses in rice (Oryza sativa L.)"Journal of Photoscience. 9. 332-334 (2002)
• [Publications] T.Hirouchi: "Class II DNA photolyase gene from Oryza sativa ; Cloning the cDNA by dilution-amplification method"Molecular Genetics and Gemonics. (In press). (2002)
• [Publications] 日出間 純: "太陽紫外線防御委員会 学術報告第12巻第1号"植物の紫外線防御機構. 29-38 (2002)