| Project/Area Number |
14770701
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Cerebral neurosurgery
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| Research Institution | Gunma University |
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Principal Investigator |
橋場 康弘 群馬大, 医学部, 助手 (10334111)
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| Project Period (FY) |
2002 – 2003
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2003)
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| Budget Amount *help |
¥3,800,000 (Direct Cost: ¥3,800,000)
Fiscal Year 2003: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2002: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
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| Keywords | cerebral vasospasm / protein kinase C / rho kinase / myosin phosphatase / myosin light chain |
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| Research Abstract |
脳血管攣縮発生のメカニズムに対する、protein kinase C (PKC)によるCPI-17のリン酸化を介したミオシンホスファターゼ活性阻害の関与を明らかにするために以下の研究を行った。
1.等尺性張力測定
正常ウサギから摘出した脳底動脈標本を用いて実験を行った。リング標本をmagnus管でKrebs-Ringer液中に懸垂し、PKC activatorであるphorbor esterにて収縮を起こさせる。ここにrho kinase inhibitorであるY-27632及びHA-1077 (Fasudil HCl)を投与したところ、収縮は抑制されなかった。同様の方法でphorbor esterにて収縮させたのちPKC inhibitorであるstaurospoline及びGF-109203xを投与すると著明な収縮の抑制が認められた。
2.MLC-20、MBS、CPI-17のリン酸化の測定
上記の実験においてPKC activator投与時及び各種antagonist投与時の各時点において反応を停止させ、血管からタンパクを抽出、ミオシン軽鎖(MLC-20)、ミオシンホスファターゼのmyosin binding site (MBS)、CPI-17のリン酸化量を定量した。定量にはWestern blotting法を用いそれぞれの抗体により化学発光で定量した。rho kinase inhibitor投与時にはMLC-20、MBS、CPI-17のリン酸化量に変化はみられなかった。PKC inhibitor投与時にはMLC-20、CPI-17のリン酸化量は抑制されたが、MBSのリン酸化量は変化しなかった。
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