パルボウイルスB19胎児障害における感染細胞内シグナル誘導機序の解明

• Project/Area Number: 14770834
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Obstetrics and gynecology
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 千坂 泰 東北大学, 医学部附属病院, 助手 (40323026)
• Project Period (FY): 2002 – 2003
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2002)
• Budget Amount: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000); Fiscal Year 2002: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
• Keywords: パルボウイルスB19 / NSI蛋白 / cell cycle arrest / ウイルス学 / 母子感染

Research Abstract

高率にパルボウイルスB19 (以下B19と略〕に感染する細胞株UT-7/Epo-S1を既に樹立しており、まずこの細胞株を用いてB19感染後の細胞内におけるシグナル伝達物質の解析を行った。このUT-7/Epo-S1細胞はB19感染後、96時間でコントロール細胞に比べて生存率が約30%減少することが分かった。また、感染72時間後に細胞内DNAの容量をfluorescence-activated cell sorter (FACS)にて調べたところ、細胞周期がG2/M期で停止している細胞が増加していることが分かった。これらのB19感染細胞ではcyclin A、cyclin B1、リン酸化、cdc2が増加し、またcdc2-cyclin B1複合体のリン酸化活性も増加しており、これは有糸分裂阻害剤で処理された細胞と同様の結果であった。しかしながら、histone H1やH3のリン酸化は見られなかった。従って感染細胞はM期には入っていなかったと考えられた。さらに、cyclin B1の局在を調べたところ細胞質に集積し核に移行しておらず、B19感染によりcyclin B1の核移行が妨げられたため細胞周期はG2期で停止したと考えられた。また、免疫組織化学染色によりB19の非構造蛋白質NSIも細胞質に集積しておりcyclin B1と共染色されることからこの細胞周期の停止にはNSI蛋白質が重要な役割を担っていると考えられた。以上よりB19感染における細胞障害には感染細胞の細胞周期G2/M期における停止が深く関わっていると考えられる。