遺伝子組み替えによる加齢性難聴モデルマウスの形態学的および電気生理学的解析

• Project/Area Number: 14770888
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Otorhinolaryngology
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 戸叶 尚史 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助手 (70334422)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 喜多村 健 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (90010470)
• Project Period (FY): 2002 – 2004
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2004)
• Budget Amount: ¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000); Fiscal Year 2004: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000); Fiscal Year 2003: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000); Fiscal Year 2002: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
• Keywords: マウス / DPOAE / ABR / 脳定位固定装置 / 探触子 / 歪成分耳音響放射 / 聴性脳幹反射 / C57BL / 6J / Six1 / Otx1 / Lfng / Fgf3 / Bmp4 / 6 / 129 / SvJ / 遺伝子 / PCR法 / マイクロサテライト / 加齢性難聴 / 難聴修飾遺伝子

Research Abstract

分子生物学の領域では疾患モデル動物としてマウスが広く用いられているが,その聴覚域値の測定に関してはABRを使用することが一般的であった.一方,DPOAEは外有毛細胞の機能を鋭敏に反映する優れた検査方法であるが,マウスの外耳道は狭く,至適周波数が高いためDPOAEの測定は困難であった.我々はMimosa acoustic社のDP-2000が24kHzまでのDPOAEの計測が可能であった点に着目し,樹脂製イアチップ単体(方法A)あるいはその先端にガラス製イアチップを装着(方法B)するという2つの方法を用いて10週齢のC57BL/6Jマウスに対してDPOAEの計測を行った.その結果,両方法ともにDPグラムの再現性が認められノイズレベルよりも高いDPレベルが求められた.両方法の比較においては,方法Aは方法Bより安定した高いDPレベルを呈したが,脳定位固定装置(成茂製作所製)による探触子の操作が必要であった.方法Bは方法Aに比べDPレベルは低く安定性は劣ったものの,用手的に探触子を保持しても計測が可能であった.このことにより,マウスDPOAEの計測は脳定位固定装置やガラスチップを使用することにより市販のDPOAE計測器械でも計測できることが明らかになった.この結果に関しては,第105回日本耳鼻咽喉科学会総会(有泉陽介,戸叶尚史,川島慶之,稲垣桂,喜多村健:マウスにおける耳音響放射測定の簡略化に関する検討)において報告した.

Research Products

• [Journal Article] Detection of mitochondrial DNA from human inner ear using real-time polymerase chain reaction and laser microdissection. (2005)
  • Author(s): Kimura Y, Kouda H, Eishi Y, Kobayashi D, Suzuki Y, Ishige I, Iino Y, Kitamura K.
  • Journal Title: Acta Otolaryngologica. 125(accepted)
• [Journal Article] Six1 controls patterning of the mouse otic vesicle. (2004)
  • Author(s): Ozaki H, Nakamura K, Funahashi J, Ikeda K, Yamada G, Tokano H, Okamura H, Kitamura K, Muto S, Kotaki H, Sudo K, Horai R, Iwakura Y, Kawakami.
  • Journal Title: Development. 131 Pages: 551-562
• [Journal Article] A clinical and genetic study in a large cohort of patients with spinocerebellar ataxia type 6. (2004)
  • Author(s): Takahashi H, Ishikawa K, Tsutsumi T, Fujigasaki H, Kawata A, Okiyama R, Fujita T, Yoshizawa K, Yamaguchi S, Tomiyasu H, Yoshii F, Mitani K, Shimizu N, Yamazaki M, Miyamoto T, Orimo T, Shoji S, Kitamura K, Mizusawa H.
  • Journal Title: J Hum Genet. 49 Pages: 256-264
  • NAID: 10013090010
• [Journal Article] A comparison of acute low-tone sensorineural hearing loss versus Meniere's disease in electrocochleography. (2004)
  • Author(s): Noguchi Y, Nishida H, Tokano H, Kawashima Y, Kitamura K.
  • Journal Title: Ann Otol Rhinol Laryngol. 113 Pages: 194-199
• [Journal Article] Audiovestibular findings in patients with mitochondrial A1555G mutation. (2004)
  • Author(s): Noguchi Y, Yashima T, Ito T, Sumi T, Tsuzuku T, Kitamura K.
  • Journal Title: Laryngoscope. 114 Pages: 344-348
• [Journal Article] Molecular analysis of the temporal bone with laser capture microdissection (LCM) and TaqMan PCR. (2004)
  • Author(s): Koda H, Kimura Y, Takahashi K, Iino Y, Kitamura K.
  • Journal Title: Association for Research in Otolaryngolgoy. 27^<th> Annual MidWinter Meeting Daytona Beach, FL 27 Pages: 145-146
• [Publications] Ozaki H., Nakamura K., Ikeda K., Tokano H., Okamura H., Kitamura K., Muto S., Kotaki H., Sudo K., Horai R., Iwakura Y., Kawakami K.: "Six1 controls patterning of the mouse otic vesicle"Development.. 131・3. 551-562 (2004)
• [Publications] Kikkawa Y., Shitara H., Wakana S., Kohara Y., Takada T., Okamoto M., Taya C., Kamiya K., Yoshikawa Y., Tokano H., Kitamura K., Shimizu K., Wakabayashi Y., Shiroishi T., Kominami R., Yonekawa H.: "Mutations in a new scaffold protein Sans cause deafness in Jackson shaker mice"Human Molecular Genetics. 12. 453-461 (2003)