ショウジョウバエの味覚受容分子機構の網羅的解析

Research Project

Project/Area Number	15011243
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	谷村禎一九州大学, 大学院・理学研究院, 助教授 (20142010)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	松本顕九州大学, 高等教育総合開発研究センター, 助手 (40229539)
Project Period (FY)	2003
Project Status	Completed (Fiscal Year 2003)
Budget Amount *help	¥5,200,000 (Direct Cost: ¥5,200,000) Fiscal Year 2003: ¥5,200,000 (Direct Cost: ¥5,200,000)
Keywords	ショウジョウバエ / 味覚 / ジーンチップ / エンハンサートラップ法 / 水受容
Research Abstract	味覚受容に関わる遺伝子を網羅的に同定するために、高密度オリゴヌクレオチドマイクロアレイを用いたゲノムワイドな網羅的スクリーニングをおこなった。ショウジョウバエの味覚感覚器が機械感覚器に転換したpoxn突然変異体と野生型由来のtotal RNAからプローブを作製してスクリーニングに用いた。poxn突然変異体で遺伝子発現量が有意に低下している遺伝子を検索し得られた遺伝子の中に、3量体Gタンパク質を構成する分子であるGγ1遺伝子があった。Gγ1遺伝子のプロモーター領域の下流にP{GAL4}エレメントが挿入された系統をUAS-GFP系統と交配し、GFPの蛍光を指標にしてGγ1遺伝子の発現部位を調べた。その結果、ショウジョウバエの味覚器である唇弁およびフ節の味細胞でGFPの蛍光が観察された。次に神経応答を阻害するUAS-EKO(electrical knock-out)系統をP{GAL4}系統と交配して味物質に対する神経応答を電気生理学的に調べたところ、糖に対する神経応答が低下していた。一方、水や塩に対する神経応答は正常だった。UAS-Shibire^<tsl>系統は、温度依存的に神経伝達を阻害できる。この系統を上記P{GAL4}系統と交配し、吻伸展反射行動テストをおこなったところ、糖に対する吻伸展応答が低下していた。したがってGFPが発現していた味細胞は糖受容細胞であると考えられる。Gγ1遺伝子に対する2本鎖RNAを組織特異的に発現するUAS-RNAi系統をGγ1遺伝子のP{GAL4}系統と交配し、味覚神経応答を電気生理学的に解析した結果、糖に対する神経応答が有意に低下していた。これらの結果から、Gγ1遺伝子は、糖に対する味覚受容シグナルトランスダクションに関与すると考えられる。