単純ヘルペスウイルスの病原性発現におけるアクセサリー遺伝子の役割

• Project/Area Number: 15019040
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 西山 幸廣 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (60115615)
• Project Period (FY): 2003
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2003)
• Budget Amount: ¥4,700,000 (Direct Cost: ¥4,700,000); Fiscal Year 2003: ¥4,700,000 (Direct Cost: ¥4,700,000)
• Keywords: 単純ヘルペスウイルス / アクセサリー遺伝子 / 病原性

Research Abstract

単純ヘルペスウイルス(HSV)は少なくとも74種の遺伝子をコードするが、その半数以上は培養細胞での増殖には必須ではないアクセサリー遺伝子である。本研究はHSVの増殖、病原性発現におけるアクセサリー遺伝子の役割、作用機構を明らかにしようとするものである。
UL14遺伝子産物は、VP26やUL33を核内に輸送する機能を有すること、分子シャペロン機能をもつことなどを明らかにしてきた。今回、UL14発現細胞(14/HEp-2)の性状について非発現細胞と比較検討したが、14/HEp-2は、様々なアポトーシス誘導刺激に対して抵抗性になっていることが判明した。さらにHSV感染細胞においてもUL14がanti-apoptoticに作用している可能性が示唆された。UL3遺伝子産物はセリン/スレオニンプロテインキナーゼ(PK)でアポトーシス抑制作用をもつことを明らかにしてきた。中枢神経系のHSV感染におけるUS3の役割を知るために脳定位固定装置を用いたマイクロインジェクション法によりマウス嗅球へUS3欠損ウイルス(LIBRI)を接種し、野生株US3レスキュー株と比較検討した。その結果、HSV感染による中枢神経細胞のアポトーシスの抑制にもUS3が関与していることが示唆された。UL51遺伝子産物は、感染後期に合成され、パルチミン酸による修飾を受けるリン酸化粒子構成蛋白質であり、種々のゴルジマーカーと共局在することを明らかにしてきた。2種類のUL51欠損ウイルス(UL51Δ)を作製したが、いずれも野生株と比べてかなり小さなplagueを形成した。電顕による観察では、粒子成熟のレベルで阻害されていることが示唆された。UL56遺伝子産物はC末端アンカー型type II膜蛋白質であること、ゴルジ体や初期エンドゾームに分布することを報告してきた。Yeast two hybrid法による解析から、UL56はKinesin super familyに属するKIFIAのC末端部分と相互作用している可能性が示唆され、これはGST-pull down法によっても確認された。

Research Products

• [Publications] Sugiura, S., Yoshikawa, T., Nishiyama, Y., et al.: "Detection of human cytomegalovirus DNA in perilymph of patients with sensorineural hearing loss using real-time PCR."J Med Virol. 69. 72-75 (2003)
• [Publications] Kudo, A., Fujita, M., Kiyono, T., et al.: "Reactivation of lytic replication from Epstein-Barr virus latently infected B-cells occurs with high S-phase CDK activity while inhibiting cellular DNA replication."J Virol. 77. 851-861 (2003)
• [Publications] Kawaguchi, Y., Kato, K., Tanaka, M., et al.: "Conserved protein kinases encoded by herpesviruses and a cellular protein kinase cdc2 target the same phosphorylation site in eukaryotic elongation factor 11δ."J Virol. 77. 2359-2368 (2003)
• [Publications] Nozawa, N., Daikoku, T., Koshizuka, T., et al.: "Subcellular localization of UL51 protein of herpes simplex virus type 1 and role of palmitoylation in Golgi targeting."J Virol. 77. 3204-3216 (2003)
• [Publications] Takakuwa, T., Goshima, F., Nozawa.N., et al.: "Oncolytic viral therapy for peritoneally disseminated tumor using a spontaneously generated herpes simplex virus type 1 variant in immunocompetent mice."Arch Virol. 148. 813-825 (2003)
• [Publications] Kimata, H., Takakuwa, H., Goshima, F., et al.: "Effective treatment of disseminated peritoneal colon cancer with new replication-competent herpes simplex virus."Hepato-Gastroenterogy. 50. 961-966 (2003)
• [Publications] Yoshikawa, T., Akimoto, S., Nishimura, N., et al.: "Evaluation of active human herpesvirus 6 infection by reverse transcription-PCR."J Med Virol. 70. 267-272 (2003)
• [Publications] Yoshikawa, T., Yoshida, J., Hamaguchi, M., et al.: "Human herpesvirus 7-associated meningitis and optic neuritis in a patient after allogeneic stem cell transplantation."J Med Virol. 70. 440-443 (2003)
• [Publications] Yoshikawa, T., Goshima, F., Akimoto, S., et al.: "Human herpesvirus 6 infection of human epidermal cell line : pathogenesis of skin manifestations."J Med Virol. 71. 62-68 (2003)
• [Publications] Mori, I., Goshima, F., Koshizuka, T., et al.: "Differential activation of JNK/SAPK and p38 MAPK signal transduction pathways in the mouse brain upon infection with neurovirulent influenza A virus."J Gen Virol. 84. 2401-2408 (2003)
• [Publications] Nawa, A., Nozawa, N., Goshima F., et al.: "Oncolytic viral therapy for human ovarian cancer using a novel replication-competent herpes simplex virus type 1 mutant in a mouse model."Gynecol Oncol. 91. 81-88 (2003)
• [Publications] Kato, K., Yokoyama, A., Tohya, Y., et al.: "Identification of protein kinases responsible for phosphorylation of Epstein-Barr virus nuclear leader protein at serine 35 that regulates its coactivator function."J Gen Virol. 84. 3381-3392 (2003)
• [Publications] Yamauchi, Y., Daikoku, T., Goshima, F., et al.: "Herpes simplex virus UL14 protein blocks apoptosis."Micribiol Immunol. 47. 685-689 (2003)
• [Publications] Kimura, H., Ito, Y., Futamura, M., Ando.Y., et al.: "Relapse of neonatal herpes simplex virus infection."Arch Dis Child. 88. 483-486 (2003)
• [Publications] Ihira, M., Yoshikawa, T., Ohashi, M., et al.: "Variation of human herpesvirus 7 shedding in saliva."J Infect Dis. 188. 1352-1354 (2003)
• [Publications] Mori, I., Goshima, F., Koshizuka, T., et al.: "The US3 protein kinase of herpes simplx virus attenuates the activation of the JNK signal transduction pathway in infected piriform cortex neurons in C57BL/6 mice."Neurosci Lett. 351. 201-205 (2003)
• [Publications] Mori, I., Goshima, F., Koshizuka, T., et al.: "Iba 1-expressing microglia-like cells respond to herpes simplex virus infection in the mouse trigeminal ganglion."Mol Brain Res. 120. 52-56 (2003)
• [Publications] Kudoh, A., Daikoku, T., Sugaya, Y., et al.: "Inhibition of S-phase cyclin-dependent kinase activity blocks expression of Epstein Bar virus immediate early and early genes, preventing viral lytic replication."J Virol. 78. 104-115 (2004)
• [Publications] Nishiyama, Y.: "Herpes simplex virus gene products : the accessories reflect her lifestyle well."Rev Med Virol. 14. 33-46 (2004)
• [Publications] Mori, I., Yokochi, T., Koide, N., et al.: "PCR search for HSV-1 genome in the brain section of patients with familal Alzheimer's disease."J Clin Microbiol. 42. 936-937 (2004)
• [Publications] Teshigahara, O., Goshima, F., Takao, K., et al.: "Oncolytic viral therapy for breast cancer with herpes simplex virus type 1 mutant HF10."J Surg Oncol. 85. 42-47 (2004)
• [Publications] Ihira M, Yoshikawa T, Enomoto Y, et al.: "Rapid diagnosis of human herpesvirus 6 infection by a novel DNA amplification method, Loop-mediated isothermal amplification."J Clin Microbiol. 42. 140-145 (2004)
• [Publications] Sugiura, S., Goshima, F., Takakuwa, H., et al.: "Treatment of solid sarcomas in immunocometent mice with novel oncolytic herpes simplex viruses."Otolaryngol Head Neck Surg. (in press). (2004)
• [Publications] Kanamoni, M., Watanabe, S., Honma, R., et al.: "Epstein-Barr virus nuclear antigen leader protein induces expression of thymus and activation-regulated chemokine in B cells."J Virol. (in press). (2004)
• [Publications] Niimi, A., Limsirichaikul, S., Yoshoda, S., et al.: "Palm residue mutant in DNA polymerases α and η alter DNA replication fidelity and translesion activity."Mol Cell Biol. (in press). (2004)
• [Publications] Mori, I., Kimura, Y., Naiki, H., et al.: "Limited reactivation of HSV-1 in the brain of patients with familial Alzheimer's disease."J Med Virol. (in press). (2004)
• [Publications] Mori, I., Nishiyama, Y., Yokochi, T., Kimura, Y.: "Virus-induced neuronal apoptosis as pathological and protective responses of the host."Rev Med Virol. (in press). (2004)
• [Publications] Nishimura, H., Yajima, T., Kagimoto, Y., et al.: "Intraepithelial γδ T may bridge a gap between innate and acquired immunity to herpes simplex virus type 2."J Virol. (in press). (2004)
• [Publications] Nakao, A., Kimata, H., Imai, T., et al.: "Intratumoral injection of herpes simplex HF10 in rexurrent breast cancer."Ann Oncol. (in press). (2004)