HIV-1Vprと相互作用する細胞内因子を介して制御されるウイルス増殖機構の解明

Research Project

Project/Area Number	15019115
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	The Institute of Physical and Chemical Research
Principal Investigator	間陽子独立行政法人理化学研究所, 分子ウイルス学研究ユニット, 研究ユニットリーダー (50182994)
Project Period (FY)	2003
Project Status	Completed (Fiscal Year 2003)
Budget Amount *help	¥5,200,000 (Direct Cost: ¥5,200,000) Fiscal Year 2003: ¥5,200,000 (Direct Cost: ¥5,200,000)
Keywords	HIV-1 Vpr / 核移行 / Importin α / Vpr変異体ウイルス / in vitro nucleor import / マイクロインジェクション / 最終分化マクロファージ / 活性化CD4^+T細胞
Research Abstract	VprはHIV粒子に取り込まれるアクセサリー遺伝子産物であり、HIV-1 Pre-integration complex(PIC)のマクロファージにおける核移行に重要である。これまで我々は、Vprがimportinαを介して核移行することを明らかにしてきた。本研究では、Vprの核移行が複数あるimportinαのisoformの内、主要な3つのisoform(Rch1Qip1,NPI-1)により促進される事を明らかにした。いずれのisoformもヒト末梢血単球および静止期CD4^+T細胞より、最終分化マクロファージおよび活性化CD4^+T細胞において高い発現が認められた。これらの細胞質画分を用いて核移行解析を行った結果、末梢血単球および静止期CD4^+T細胞では、Vprは核膜に局在したままであったが、最終分化マクロファージおよび活性化CD4^+T細胞で核移行を示したことから、この核移行の促進効果は、Rch1の発現量と比例している可能性が示唆された。一方、importinαとの結合能を失ったVpr変異体は核移行を示さなかった。さらに、最終分化マクロファージにVprをマイクロインジェクションすると核移行を示したが、変異体では消失した。同様に、このVpr変異体を有するHIV-1のマクロファージおよび活性化CD4^+T細胞への感染性が著しく減弱した。以上の結果から、生体内のHIV-1標的細胞におけるHIV-1感染において、Vprの核移行能の重要性が示された。