発がん抑制に機能するDNA修復タンパクにおける相同組換え活性ドメイン

Research Project

Project/Area Number	15023207
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Allocation Type	Single-year Grants
Review Section	Biological Sciences
Research Institution	Ibaraki University
Principal Investigator	田内広茨城大学, 理学部, 助教授 (70216597)
Project Period (FY)	2003
Project Status	Completed (Fiscal Year 2003)
Budget Amount *help	¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000) Fiscal Year 2003: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Keywords	高発癌遺伝病 / 相同組換え修復 / 遺伝子安定性
Research Abstract	高頻度の悪性腫瘍発症や放射線高感受性、S期チェックポイント異常を示す遺伝病、ナイミーヘン症候群(NBS)の原因タンパクNbs1は、Rad50/Mre11と複合体を形成し、その局在や活性を制御してDNA二重鎖切断(dsb)修復において重要な役割を有している。代表者は、NBS1がdsb修復過程のうちでも正確に損傷を修復する機構である相同組換え修復に必須であることを明らかにし、その機能がどのようにして発現されているのかを解明することを目指している。本研究では、Nbs1タンパクにおいて相同組換え修復に重要なドメインを明らかにするため、NBS患者由来細胞株に相同組換えを検出するレポーター遺伝子SCneoを導入して解析を進めた。SCneoレポーターは特定の箇所にdsbを導入し、細胞の薬剤耐性からその後の修復が相同組換えであるかどうかが判定できるシステムである。今年度における研究の結果、SCneo導入NBS患者細胞では、Nbs1ノックアウト細胞と同様に相同組換え頻度が顕著に低下する一方で、その組換え頻度の低下は、全長NBS1タンパクを発現させることで正常ヒト細胞と同等のレベルにまで回復した。さらに、いくつかの変異NBS1タンパクの発現下で相同組換え頻度がどのように変化するかを調べたところC末のMre11結合ドメインが相同組換え活性に必須であることが明らかとなった。このことからヒト細胞においてもNbs1は相同組換えに重要であり、Mre11/Rad50複合体の相同組換え機能を制御していることが示唆された。