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アミノアシル-tRNA合成酵素に基質認識機構の解明と選択的阻害剤開発に関する研究

Research Project

Project/Area Number 15770084
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Functional biochemistry
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

滝田 禎亮  京都大学, 農学研究科, 助手 (70263126)

Project Period (FY) 2003 – 2005
Project Status Completed (Fiscal Year 2005)
Budget Amount *help
¥3,500,000 (Direct Cost: ¥3,500,000)
Fiscal Year 2005: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2004: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
Fiscal Year 2003: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Keywordsアミノアシル-tRNA合成酵素 / リジル-tRNA合成酵素 / 阻害剤 / 基質認識機構 / アミノアシル4RNA合成酵素
Research Abstract

1 X-線結晶構造解析
平成17年度は、以下の2点を計画した。
(1)BsLysRSの反応中間体リジルアデニレート及びそのアナログとの複合体。
(2)(1)にピロリン酸アナログを加えたもの。
現在までに、(1)については、リジンスルファモイルアデニレートとの高解像度の結果が得られた。一方、(2)については、高解像度の結果は得られていない。しかし、L-リジンアミドとATPの三者複合体について高解像度の結果が得られた。これらの結果から、大腸菌LysRSで観測されていない構造変化を観察でき、BsLysRSの反応機構に関して新規な情報が得られた。
2 ピロリン酸アナログ及びヒドロキサメートの阻害機構の解析
平成17年度は、以下の2点を計画した。
(1)BsLysRSに加えて、Bacillus stearothermophilusのTrpRS(BsTrpRS)、大腸菌由来のTyrRSとTrpRS(EcTyrRSとEcTrpRS)、ヒト由来LysRS(hLysRS)におけるピロリン酸アナログの阻害を、ATP-PPi交換反応を用い反応条件を変化させて調べる。
(2)ヒドロキサメートの阻害を、ATP-PPi交換反応を用い反応条件を変化させて調べる。
(1)では、アナログ種とpHを変化させることにより、各酵素を選択的に阻害できることが明らかになった。(2)では、これら酵素が、特徴的な阻害をヒドロキサメートにより受けることが明らかになった。これらの結果から、各酵素の微細な活性部位での環境の差により阻害機構が大きく異なる可能性が示唆された。

Report

(3 results)
  • 2005 Annual Research Report
  • 2004 Annual Research Report
  • 2003 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2006 2004

All Journal Article (7 results)

  • [Journal Article] リジルtRNA合成酵素の基質L-リジンの側差認識部位Glu418への変異導入によるアミノ酸基質特異性の改変2006

    • Author(s)
      阿波君枝, 滝田禎亮, 桜間晴子, 井上國世
    • Journal Title

      日本農芸化学会大会講演要旨集

      Pages: 301-301

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] アミノアシルtRNA合成酵素のピロリン酸アナログによる選択的阻害2006

    • Author(s)
      滝田禎亮, 平井伸博, 大山創平, 和田 工, 井上國世
    • Journal Title

      日本農芸化学会大会講演要旨集

      Pages: 301-301

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      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] Bacillus stearothermophilus由来リジルtRNA合成酵素:野生型、N414A、及びR402KのL-リジン活性化反応に関するエネルギー図2004

    • Author(s)
      滝田禎亮, 外村辨一郎, 井上國世
    • Journal Title

      生化学 76・8

      Pages: 777-777

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      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Bacillus stearothermophilus由来リジルtRNA合成酵素:野生型及びN414D変異体のL-リジン複合体のX線結晶構造解析2004

    • Author(s)
      滝田禎亮, 桜間晴子, 三上文三, 伊藤貴文, 外村辨一郎, 井上國世
    • Journal Title

      生化学 76・8

      Pages: 777-777

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      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Bacillus stearothermophilus由来リジルtRNA合成酵素:遷移状態を安定化するクロスサブユニット間相互作用の変異導入解析2004

    • Author(s)
      滝田禎亮, 猿渡由寛, 井上國世
    • Journal Title

      生化学 76・8

      Pages: 778-778

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      2004 Annual Research Report
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    • Author(s)
      滝田禎亮, 和田 工, 井上國世
    • Journal Title

      生化学 76・8

      Pages: 778-778

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      2004 Annual Research Report
  • [Journal Article] Bacillus stearothermophilus由来リジルtRNA合成酵素:基質L-リジンのε-アミノ基を認識するGlu418変異体のしリジンアナログに対する基質特異性2004

    • Author(s)
      滝田禎亮, 阿波君枝, 桜間晴子, 井上國世
    • Journal Title

      生化学 76・8

      Pages: 777-777

    • Related Report
      2004 Annual Research Report

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Published: 2003-04-01   Modified: 2016-04-21  

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