フラビウイルスの節足動物細胞における感染・増殖機構に関する分子基盤の解明

Research Project

Project/Area Number	15780196
Research Category	Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
Allocation Type	Single-year Grants
Research Field	Applied veterinary science
Research Institution	Nagasaki University
Principal Investigator	早坂大輔長崎大学, 熱帯医学研究所, 助手 (10346926)
Project Period (FY)	2003 – 2005
Project Status	Completed (Fiscal Year 2003)
Budget Amount *help	¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000) Fiscal Year 2003: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
Keywords	ダニ媒介性脳炎ウイルス / レプリコン / GFP / 持続感染細胞
Research Abstract	ダニ媒介性脳炎ウイルス(TBEV)のレプリコンを作製した。感染性cDNAクローンを用いてTBEVの構造蛋白(核蛋白、膜蛋白およびエンベロープ蛋白)の大部分を欠損させ、Baby hamster kidoney(BHK)細胞にトランスフェクションしウイルス蛋白の発現、ウイルスRNAの複製を確認した。次いで、TBEVレプリコンへ外来性遺伝子としてGreen Fluorescent protein(GFP)遺伝子を導入しその発現を確認した。さらに、細胞内において持続的にレプリコンが発現する系を作製するために、Neo遺伝子を導入しジェネティシンによりレプリコン持続感染細胞を選択した。本研究で作製されたレプリコンを用いることにより、蚊媒介性およびダニ媒介性脳炎ウイルスのキメラウイルスの作製、ダニ細胞でのレプリコン持続細胞の作製などが可能となった。