食道表在癌においてマリンパ節転移を制御する因子の同定

• Project/Area Number: 15790356
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Gastroenterology
• Research Institution: Dokkyo Medical University
• Principal Investigator: 藤田 幹夫 獨協医科大学, 医学部, 助手 (00343450)
• Project Period (FY): 2003 – 2004
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2004)
• Budget Amount: ¥3,600,000 (Direct Cost: ¥3,600,000); Fiscal Year 2004: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000); Fiscal Year 2003: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
• Keywords: 食道癌 / CXCR4 / 転移 / マイクロアレイ解析 / 免疫組織化学 / 頭頸部癌 / 分化誘導 / ヒストンアセチル化 / sp-1 / 転写活性化

Research Abstract

食道扁平上皮癌のリンパ節転移に関連する因子のスクリーニングに,食道癌培養細胞T.Tn (Sakai et al.Int.J.Oncol, 2002)を用いた.まず,in vitroにおいてT.Tn細胞から遊走能の高い細胞,あるいは細胞-細胞間,細胞-基質間の接着能の高い細胞をクローニング後,ヌードマウス同所性移植モデル(Furihata et al.Int.J.Oncol, 2001)を用いて,リンパ節転移を示す亜株T.Tn-AT1を分離した.次に,T.Tn細胞とT.Tn-AT1細胞における遺伝子発現の違いを9206個の遺伝子をスポットしているCodeLink Bioarray (Motorola)を用いて検索した.予想された通り両細胞の遺伝子発現は類似しており,3倍以上の発現の差が認められた遺伝子はわずか34個であった.34遺伝子のうち29個はT.Tn-AT1において発現が低下しており,5個は発現が上昇していた.34遺伝子のうち,その発現の差が顕著であり,浸潤転移に関与が高いと考えられた14遺伝子に関して半定量RT-PCRを行い,その発現の差を確認した.その結果9遺伝子(KAL1,HPGD,NDN,REG1A,CXCR4,SPOCK,DIAPH2,AIF1,VNN2)にマイクロアレイと同様の結果が得られた.これら9遺伝子は,それぞれ細胞接着,遊走,炎症,増殖,分化に関る遺伝子であり,転移過程で重要な役割を果たしていると考えられた.このようなマイクロアレイによるスクリーニングで得られた分子のうちCXCR4についての解析を進めた.ヒト食道扁平上皮癌の手術検体を用いた免疫組織化学では,非腫瘍部の基底層,腫瘍先進部や脈管侵襲部位の一部において蛋白の核内発現が観察された.

Research Products

• [Journal Article] 分子生物学から見た大腸癌発生 (2005)
  • Author(s): 藤田幹夫
  • Journal Title: 消化器外科 (In press)
• [Journal Article] Barrett食道の定義 (2005)
  • Author(s): 藤田幹夫
  • Journal Title: 日本臨床 (In press)
• [Journal Article] 表在食道癌の診断と治療:病理 (2005)
  • Author(s): 藤田幹夫
  • Journal Title: Mebio 22 Pages: 62-68
• [Journal Article] Tumor cell dissociation (TCD) score highly correlates with lymph node metastasissuperficial esophageal carcinoma. (2005)
  • Author(s): Chibana Y
  • Journal Title: J Gastrohepatorol (In press)
• [Journal Article] Analysis of incidence of K-ras mutation and expression of cyclooxygenase-2 and gastrin protein in laterally spreading tumors. (2005)
  • Author(s): Mukawa K
  • Journal Title: J Gastrohepatorol (In press)
• [Journal Article] 消化管疾患遺伝子診断の進歩 (2004)
  • Author(s): 藤田幹夫
  • Journal Title: Mebio 21 Pages: 12-21
• [Book] 消化器病セミナー(96),Barrett食道 (2004)
  • Author(s): 藤田幹夫
  • Total Pages: 163
  • Publisher: へるす出版,東京
• [Publications] Kawamata H., Furihata T., Omotehara F., et al.: "Identification of genes differentially expressed in a newly isolated human metastasizing esophageal cancer cell line, T.Tn-AT1,by CDNA microarray."Cancer Sci.. 94・8. 699-706 (2003)
• [Publications] Kaihara T., Kusaka T., Nishi M., Kawamata H., et al.: "Dedifferentiation and decreased expression of adhesion molecules, E-cadherin and ZO-1,in colorectal cancer are closely related to liver metastasis."J Exp Clin Cancer Res.. 22・1. 117-123 (2003)
• [Publications] Kaihara T., Kawamata H.et al.: "Possible association with epidermal growth factor receptor-induced tyrosine phosphorylation of ZO-1."Cancer Sci.. 94・2. 166-172 (2003)
• [Publications] Horiuchi H, Kawamata H, et al.: "A MEK inhibitor (U0126) prolongs survival in nude mice bearing human gallbladder cancer cells with k-ras mutation : Analysis in a novel orthotopic inoculation model."Int.J.Oncol.. 23・4. 957-963 (2003)